【摘 要】
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开发一种将肿瘤坏死因子α(TNFα)分泌到大肠杆菌周质空间的表达策略。将实验室自主研发的新型融合标签Ffu与TNFα融合后克隆制备成重组质粒pFfu-TNFα。对重组蛋白的表达条
【机 构】
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南京工业大学生物与制药工程学院,台州市中心医院（台州学院附属医院）,南京工业大学药学院
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81673321)
论文部分内容阅读
开发一种将肿瘤坏死因子α(TNFα)分泌到大肠杆菌周质空间的表达策略。将实验室自主研发的新型融合标签Ffu与TNFα融合后克隆制备成重组质粒pFfu-TNFα。对重组蛋白的表达条件进行优化,通过灰度扫描得重组目的蛋白占总蛋白表达量的76%左右,其中可溶性组分占89%左右;定向释放周质蛋白,Western blotting鉴定重组蛋白的免疫原性:纯化后测定周质空间的重组蛋白Ffu209-TNFα表达量,最高可达12 mg/L。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测重组蛋白对L929细胞的细胞毒活性,结果显示:新
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