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本文改进了HPT-ELISA检测法,利用一种简便并且高效的微生物表达体系,将hpt基因的全编码序列克隆到原核表达质粒pGEX—KG上,在E.Coli菌株B121(DE3)-pLys中进行诱导表达,获得了融合蛋白GST—HPT,经Thrombin凝血酶酶切过夜,再经过柱纯化后获得不合GST且具有生物活性的HPT纯蛋白,所得蛋白纯度〉90%。MALDI—TOF—MS分析表明,HPT蛋白分子量为39.4KD。用HPT纯蛋白免疫家兔,制备了高效价的多克隆抗体,进而构建了双抗夹心酶联免疫检测方法,其灵敏度为0.31