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目的
探讨正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞钾离子通道的组成及二十二碳六烯酸(DHA)的激活作用。
方法采用酶消化法急性分离正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞,以全细胞膜片钳技术记录灌流不同钾离子通道阻滞剂后钾离子通道电流的变化,以及DHA灌流后钾离子通道电流变化。
结果未加阻滞剂时,5 μmol/L DHA灌流后钾离子通道电流明显增加,在刺激电压为100 mV时,DHA灌流前后的电流密度分别为(52.80±6.68)和(110.09±13.39) pA/pF(P<0.05)。在非特异性钾离子通道阻滞剂四乙胺10 mmol/L作用下,DHA灌流不能激活钾离子通道。与未灌流时基础状态比较,在大电导钙激活钾离子通道特异性阻滞剂ibritoxin 100 nmol/L、中电导钙激活钾离子通道阻滞剂TRAM-34 200 nmol/L、小电导钙激活钾离子通道阻滞剂apamin 1 μmol/L、电压依赖性钾离子通道阻滞剂4-aminopyridine 5 mmol/L和ATP依赖性钾离子通道阻滞剂glyburide 10 μmol/L作用下,钾离子通道电流密度分别减少47.6%、12.4%、13.6%、41.5%和0.1%,再同时灌流DHA后钾离子通道电流密度分别增加32.4%、124.2%、108.5%、149.5%和144.7%。
结论大电导钙激活钾离子通道与电压依赖性钾离子通道为正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞上分布的主要的钾离子通道。DHA可激活冠状动脉平滑肌细胞钾离子通道,其中主要为大电导钙激活钾离子通道,这可能是DHA扩张冠状动脉、保护心血管系统的机制之一。