【摘 要】
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为建立传染性脾肾坏死病毒（ISKNV）灭活快速检验方法,从ISKNV感染CPB细胞系转录谱筛选并经q RT-PCR验证表达量最高的病毒ORF099基因作为快速检测靶基因。以质粒p MDORF099为标准
【机 构】
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华中农业大学水产学院,广东省水生动物疫病预防控制中心,中国水产科学研究院珠江水产研究所,淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心
【基金项目】
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国家科技支撑计划（2012BAD25B02）, 广东省海洋渔业科技推广专项（A201501B12）
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为建立传染性脾肾坏死病毒（ISKNV）灭活快速检验方法,从ISKNV感染CPB细胞系转录谱筛选并经q RT-PCR验证表达量最高的病毒ORF099基因作为快速检测靶基因。以质粒p MDORF099为标准品,采用q PCR方法绘制了CT值与质粒拷贝数的标准曲线,其线性方程为CT=–3.42lgx＋39.455,最低检测限为3拷贝/μL,结果显示组间和组内变异系数均小于2%,表明该方法具有较高的灵敏度和较好的重复性。将ISKNV病毒悬液10倍稀释成100～103拷贝/m L,分别取1 m L病毒稀释液接种CP
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