土曲霉植酸酶基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达

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【摘要】

：

参考已报道的植酸酶基因phyA全序列设计一对引物,用PCR方法从土曲霉(Aspergillus terreus)总DNA中扩增到去除信号肽和内含子后约1.4kb的phyA基因编码区片段,对该片段进行了克

【作者】

：

伍洛夫周俊初赵述淼

【机构】

：

华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

【出处】

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湖北农业科学

【发表日期】

：

2005年3期

【关键词】

：

土曲霉植酸酶 PHYA基因毕赤酵母表达 A. fumigatus phytase phyA Pichia pastoris expression

【基金项目】

：

湖北省自然科学基金

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参考已报道的植酸酶基因phyA全序列设计一对引物,用PCR方法从土曲霉(Aspergillus terreus)总DNA中扩增到去除信号肽和内含子后约1.4kb的phyA基因编码区片段,对该片段进行了克隆与序列测定.进一步用该片段构建了pPIC9K-phyA分泌型表达载体,并转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115.通过表达产物的酶活性检测和SDS-PAGE电泳分析,植酸酶在重组转化子中得到了有效分泌和高效表达.摇瓶诱导发酵132 h后发酵液中植酸酶的活性可达167 u·mL-1

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