人巨细胞病毒单克隆抗体识别的抗原表位的筛选

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaomayc
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目的找出人巨细胞病毒(HCMV)单克隆抗体识别的抗原表位以进行HCMV多肽疫苗的研制。方法通过链亲和素-生物素的作用将HCMV单抗固定在酶联板上,加入噬菌体随机六肽文库,经过三轮捕捉、洗脱、扩大培养的筛选过程,并逐轮增加冲洗强度,与HCMVMcAb具有亲合力的噬菌体得到了富集;从最后得到的三级库中,随机挑选16个单克隆,测定其所携带的外源DNA的序列,找出一致序列并进行同源性查询。结果16个克隆中有15个序列相同,5'-AGTGCTGGTTGGGCTTCT-3',对应的氨基酸序列为Ser-Ala-Gly-Trp-Ala-Ser,此序列同源性查询结果显示与HCMV病毒膜糖蛋白UL01有78.8%的同源性,其中有4个氨基酸残基(AGWA)是完全相符的。结论所筛选到的六肽序列可能为HCMV抗原表位,从而说明用噬菌体肽库技术寻找抗原表位的可行性
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