【摘 要】
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丙氨酸脱氢酶（alanine dehydrogenase,Ald）是一种NAD＋依赖性的氨基酸脱氢酶,能可逆地催化丙氨酸氧化脱氨生成丙酮酸和氨.实验以假坚强芽孢杆菌的丙氨酸脱氢酶为研究对象,将目的
【机 构】
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天津科技大学生物工程学院,天津国际生物医药联合研究院
【基金项目】
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国家自然科学基金青年科学基金资助项目（31300601）
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丙氨酸脱氢酶（alanine dehydrogenase,Ald）是一种NAD＋依赖性的氨基酸脱氢酶,能可逆地催化丙氨酸氧化脱氨生成丙酮酸和氨.实验以假坚强芽孢杆菌的丙氨酸脱氢酶为研究对象,将目的基因克隆到p ET-22,b（＋）原核表达载体上,并在大肠杆菌中完成蛋白的高效表达.通过镍离子亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析等纯化方法,得到了高纯度的目的蛋白.利用气相扩散法对目的蛋白进行结晶,最终得到分辨率为0.31,nm的蛋白晶体.
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