【摘 要】
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目的 观察β肾上腺素能受体对肾脏球旁器颗粒(JG)细胞肾素分泌的调节作用.方法 密度梯度离心原代分离野生型和β1/β2肾上腺素受体基因敲除小鼠肾小球球旁器(JGA)颗粒细胞(JG
【机 构】
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中国医学科学院,美国国立卫生研究院
【基金项目】
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NIH、NIDDK及NHLBI校内基金;
论文部分内容阅读
目的 观察β肾上腺素能受体对肾脏球旁器颗粒(JG)细胞肾素分泌的调节作用.方法 密度梯度离心原代分离野生型和β1/β2肾上腺素受体基因敲除小鼠肾小球球旁器(JGA)颗粒细胞(JGC).实时PCR明确JG细胞上存在β1/β2肾上腺素能受体基因表达.激光共聚焦显微镜下动态观察喹林和Lyso Tracker-Red染色条件下异丙肾上腺素促使JG活细胞分泌肾素的动态过程.尾静脉取血,用放射免疫方法测定清醒状态野生型和β1/β2肾上腺素能受体基因敲除小鼠基础肾素水平.不同浓度前列腺素E2(PGE2)、异丙肾上腺素和福斯高林刺激野生型和β1/β2肾上腺素能受体基因缺失小鼠JG细胞,放免法测定细胞内和上清中肾素活性.实时PCR测定肾皮质及JG细胞中肾素mRNA水平,以及不同浓度福斯高林对JG细胞内cAMP浓度的影响.结果 成功分离的JG细胞上存在β肾上腺素能受体基因表达.激光共聚焦显微镜能观察到异丙肾上腺素明显刺激JG细胞分泌包含肾素的酸性颗粒.β1/β2肾上腺素能受体基因敲除小鼠血浆基础肾素降低,与肾脏皮质肾素mRNA降低平行.原代培养的β1/β2肾上腺素能受体基因敲除小鼠的JG细胞,肾素产生和分泌都明显降低,肾素mRNA也降低.PGE2、异丙肾上腺素和福斯高林呈剂量依赖性增加野生型小鼠JG细胞肾素转录、合成和分泌.β1/β2肾上腺素能受体基因敲除小鼠JG细胞对β肾上腺素能受体激动剂没有反应,而大剂量福斯高林能刺激其肾素分泌.福斯高林呈剂量依赖性上调JG细胞内cAMP水平.结论 JG细胞上存在的肾上腺素能β受体,通过上调JG细胞内cAMP,促使JG细胞合成和分泌肾素.
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