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摘要：目的 优选安乳颗粒的水煎工艺。方法 以浸膏得率和芍药苷含量为指标，采用L9（34）正交试验进行优选。结果 水煎工艺影响因素依次为加水量、提取时间和浸泡时间。最佳工艺条件为加8倍量水，煎煮2次，每次1.0 h。结论 优选的水煎工艺易于操作，合理可行。
关键词：安乳颗粒；水煎工艺；正交试验
中图分类号：R283.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2012）04-0053-03
安乳颗粒为甘肃省医学科学研究院院内制剂，主要由柴胡、当归、赤芍、丹参等12味中药组成，具有软坚散结、理气止痛、化血消痈之功效，对乳腺肿块、乳腺增生症有显著疗效[1]。为了研究安乳颗粒的制备工艺，探讨安乳颗粒的最佳水煎工艺，本研究采用正交试验，以芍药苷和浸膏得率2种指标的综合评分为考察指标，优选水煎煮提取工艺。
1 仪器与试药
Agilent1100型高效液相色谱仪（美国Agilent公司）；461型旋转薄膜蒸发仪（瑞士B?CHI公司）；AE260万分之一天平（瑞士Mettle公司）；CP225D型十万分之一电子分析天平（德国赛多利斯公司）；766型远红外快速干燥箱（江苏省南通县金余电器配件厂）。
芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号110736-200424，供含量测定用），甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂为分析纯。所用药材购自甘肃兰州黄河药市，经甘肃省医学科学研究院分析实验中心检测，均符合2005年版《中华人民共和国药典》（一部）各药材项下标准。
2 方法与结果
2.1 浸膏得率测定
按1/10处方量称取各味药材及药渣，加10倍量水，按设计的煎煮次数和时间进行提取，水煎液用350目滤布滤过，滤液浓缩至50 mL。然后精密量取20 mL，置已恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105 ℃干燥3 h，取出，置干燥器中放置30 min，称定重量，计算浸膏得率，其计算公式为：浸膏得率=（浸膏量÷20）×总药液量/药材量×100%。
2.2 芍药苷含量测定
2.2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：Agilent C18柱（4.6 mm×250 mm，5 ?m）；流动相：乙腈-水（13∶87）；检测波长：230 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：10 ?L[2]。精密吸取芍药苷对照品溶液、供试品溶液各10 ?L，按上述色谱条件分别进样测定，色谱图见图1。可见，供试品中芍药苷峰与对照品峰保留时间一致，并且与样品中其他组分达到很好的分离，分离度>1.5，理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3 000。
2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品适量，用甲醇配制成每1 mL含0.12 mg的溶液，即得。
2.2.3 样品溶液的制备 按1/10处方量称取各味药材及药渣，加10倍量水，按设计的煎煮次数和时间进行提取，合并煎液，用350目滤布滤过，滤液浓缩至50 mL。然后精密量取水煎液20 mL，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取3次（25、25、20 mL），合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇20 mL溶解并定容至刻度，用0.45 ?m的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.2.4 线性关系考察 精密吸取芍药苷对照品溶液1、2、4、6、8、10 mL至10 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，各进样10 ?L，按上述色谱条件测定峰面积；以峰面积值为纵坐标，芍药苷进含量（?g）为横坐标进行线性回归，得回归方程：Y=2 482 038.47X+111 442.31，r=0.999 8，表明芍药苷在0.12～1.20 ?g范围内具有良好的线性关系。
2.2.5 精密度试验 精密吸取芍药苷对照品溶液10 ?L，重复进样8次，测得芍药苷峰面积的RSD=0.98%，表明仪器精密度良好。
2.2.6 稳定性试验 精密吸取供试品溶液10 ?L，按上述色谱条件分别在0、0.5、1、2、4、8、12 h进样测定，测得芍药苷峰面积的RSD=1.80%，表明供试品溶液在12 h内稳定。
2.2.7 重复性试验 按1/10处方量称取各味药材及药渣6份，分别加10倍量水，煎煮2次，每次1.5 h，其他按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，依上述色谱条件，分别进样10 ?L测定，结果芍药苷平均含量RSD=0.65%，表明本法重复性好。
2.2.8 含量测定 精密吸取供试品溶液10 ?L，按上述色谱条件进样测定。
2.3 吸水率的考察
按处方比例称取赤芍、王不留行、橘核、海藻、昆布、鹿角霜及制香附、当归、柴胡提油后的药渣[3]和丹参醇提后的药渣[4]，加10倍量水浸泡，每隔30 min观察1次浸泡情况，直至药材全部透心，滤过，湿药材称重，测得药材的吸水率为219%。
2.4 水煎煮次数的选择
以浸膏得率及芍药苷为评价指标，考察水煎工艺的煎煮次数。测定结果见表1。结果表明，以同样条件煎煮3次，其浸膏总得率为27.13%，其中第1次占57.46%，第2次占31.37%，第3次仅占11.17%；芍药苷总提取量为15.390 mg，其中第1次占61.05%，第2次占29.32%，第3次占9.63%。考虑到第3次提取量不大，从节约时间减少成本考虑，将煎煮次数确定为2次。
3 讨论
在研究安乳颗粒的制备工艺时，笔者根据方中各药味的有效成分和性质，并充分考虑中药配伍君、臣、佐、使，七情合和的用药理论，将当归、制香附、柴胡用水提取，收集挥发油和水煎液[3]；丹参用80%乙醇提取脂溶性成分[4]；制乳香、制没药用80%乙醇提取脂溶性成分[5]；然后将当归、制香附、柴胡提油后的药渣以及丹参醇提后的药渣，与赤芍、王不留行、橘核、海藻、昆布、鹿角霜通过混煎提取。
关键词：安乳颗粒；水煎工艺；正交试验
中图分类号：R283.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2012）04-0053-03
安乳颗粒为甘肃省医学科学研究院院内制剂，主要由柴胡、当归、赤芍、丹参等12味中药组成，具有软坚散结、理气止痛、化血消痈之功效，对乳腺肿块、乳腺增生症有显著疗效[1]。为了研究安乳颗粒的制备工艺，探讨安乳颗粒的最佳水煎工艺，本研究采用正交试验，以芍药苷和浸膏得率2种指标的综合评分为考察指标，优选水煎煮提取工艺。
1 仪器与试药
Agilent1100型高效液相色谱仪（美国Agilent公司）；461型旋转薄膜蒸发仪（瑞士B?CHI公司）；AE260万分之一天平（瑞士Mettle公司）；CP225D型十万分之一电子分析天平（德国赛多利斯公司）；766型远红外快速干燥箱（江苏省南通县金余电器配件厂）。
芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号110736-200424，供含量测定用），甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂为分析纯。所用药材购自甘肃兰州黄河药市，经甘肃省医学科学研究院分析实验中心检测，均符合2005年版《中华人民共和国药典》（一部）各药材项下标准。
2 方法与结果
2.1 浸膏得率测定
按1/10处方量称取各味药材及药渣，加10倍量水，按设计的煎煮次数和时间进行提取，水煎液用350目滤布滤过，滤液浓缩至50 mL。然后精密量取20 mL，置已恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105 ℃干燥3 h，取出，置干燥器中放置30 min，称定重量，计算浸膏得率，其计算公式为：浸膏得率=（浸膏量÷20）×总药液量/药材量×100%。
2.2 芍药苷含量测定
2.2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：Agilent C18柱（4.6 mm×250 mm，5 ?m）；流动相：乙腈-水（13∶87）；检测波长：230 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：10 ?L[2]。精密吸取芍药苷对照品溶液、供试品溶液各10 ?L，按上述色谱条件分别进样测定，色谱图见图1。可见，供试品中芍药苷峰与对照品峰保留时间一致，并且与样品中其他组分达到很好的分离，分离度>1.5，理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3 000。
2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品适量，用甲醇配制成每1 mL含0.12 mg的溶液，即得。
2.2.3 样品溶液的制备 按1/10处方量称取各味药材及药渣，加10倍量水，按设计的煎煮次数和时间进行提取，合并煎液，用350目滤布滤过，滤液浓缩至50 mL。然后精密量取水煎液20 mL，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取3次（25、25、20 mL），合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇20 mL溶解并定容至刻度，用0.45 ?m的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.2.4 线性关系考察 精密吸取芍药苷对照品溶液1、2、4、6、8、10 mL至10 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，各进样10 ?L，按上述色谱条件测定峰面积；以峰面积值为纵坐标，芍药苷进含量（?g）为横坐标进行线性回归，得回归方程：Y=2 482 038.47X+111 442.31，r=0.999 8，表明芍药苷在0.12～1.20 ?g范围内具有良好的线性关系。
2.2.5 精密度试验 精密吸取芍药苷对照品溶液10 ?L，重复进样8次，测得芍药苷峰面积的RSD=0.98%，表明仪器精密度良好。
2.2.6 稳定性试验 精密吸取供试品溶液10 ?L，按上述色谱条件分别在0、0.5、1、2、4、8、12 h进样测定，测得芍药苷峰面积的RSD=1.80%，表明供试品溶液在12 h内稳定。
2.2.7 重复性试验 按1/10处方量称取各味药材及药渣6份，分别加10倍量水，煎煮2次，每次1.5 h，其他按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，依上述色谱条件，分别进样10 ?L测定，结果芍药苷平均含量RSD=0.65%，表明本法重复性好。
2.2.8 含量测定 精密吸取供试品溶液10 ?L，按上述色谱条件进样测定。
2.3 吸水率的考察
按处方比例称取赤芍、王不留行、橘核、海藻、昆布、鹿角霜及制香附、当归、柴胡提油后的药渣[3]和丹参醇提后的药渣[4]，加10倍量水浸泡，每隔30 min观察1次浸泡情况，直至药材全部透心，滤过，湿药材称重，测得药材的吸水率为219%。
2.4 水煎煮次数的选择
以浸膏得率及芍药苷为评价指标，考察水煎工艺的煎煮次数。测定结果见表1。结果表明，以同样条件煎煮3次，其浸膏总得率为27.13%，其中第1次占57.46%，第2次占31.37%，第3次仅占11.17%；芍药苷总提取量为15.390 mg，其中第1次占61.05%，第2次占29.32%，第3次占9.63%。考虑到第3次提取量不大，从节约时间减少成本考虑，将煎煮次数确定为2次。
3 讨论
在研究安乳颗粒的制备工艺时，笔者根据方中各药味的有效成分和性质，并充分考虑中药配伍君、臣、佐、使，七情合和的用药理论，将当归、制香附、柴胡用水提取，收集挥发油和水煎液[3]；丹参用80%乙醇提取脂溶性成分[4]；制乳香、制没药用80%乙醇提取脂溶性成分[5]；然后将当归、制香附、柴胡提油后的药渣以及丹参醇提后的药渣，与赤芍、王不留行、橘核、海藻、昆布、鹿角霜通过混煎提取。