柱前衍生化法测定晶帽石斛中总氨基酸含量

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目的测定晶帽石斛中总氨基酸的种类及含量。方法以2,4-二硝基氟苯为衍生试剂,与晶帽石斛中氨基酸柱前衍生,用Waters 600高效液相色谱仪,菲罗门公司Symmetry C18色谱柱,以0.05 mol.L-1醋酸钠-醋酸缓冲液(pH=6.4),加入1%N,N-二甲基甲酰胺及乙腈∶水(1∶1)进行梯度洗脱,检测波长为360 nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果各氨基酸的线性回归方程r值为0.999 5~1.000 0(n=5),平均回收率99.34%~101.93%,RSD0.54%~1.91%,n=6,氨基酸平均含量3.79%。结论该方法操作较简便,结果准确,氨基酸的损失量小,能够满足实验要求,为晶帽石斛开发提供了理论依据。
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