【摘 要】
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为优化用于蛋白质组研究的二维电泳技术和计算机图象分析技术,以及初步分析比较与肿瘤细胞转移相关的蛋白质,以人肺巨细胞癌(PLA-801-D、C)高、低转移株作为研究对象,应用IPG
【机 构】
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军事医学科学院放射医学研究所北京,重庆医科大学重庆,中国科学院生物物理研究所北京
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为优化用于蛋白质组研究的二维电泳技术和计算机图象分析技术,以及初步分析比较与肿瘤细胞转移相关的蛋白质,以人肺巨细胞癌(PLA-801-D、C)高、低转移株作为研究对象,应用IPGphor进行第一向等电聚焦,随后,在Protein Ⅱ IPG conversion Kit上进行垂直SDS-PAGE的分离.利用光密度仪对银染的凝胶扫描,通过PDQuest软件进行蛋白斑点检测和配比.结果表明:(1)应用IPGphor,采用样品直接加入重泡胀溶液的形式,增大了溶解性,缩短聚焦时间、增大样品负荷量(分析型),提高了分辨率.(2)比较宽(pH=3～10L)、窄(pH=4～7L)范围IPG胶条,窄pH范围的IPG胶条具有较高的分辨率.(3)比较PLA-801-C、D细胞蛋白图谱之间的差异,其相关系数为0.7339±0.0291;仅在PLA-801-C株出现的蛋白为179个.
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