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1 材料和方法rn1.1 材料 KM小鼠,孕13.5 d,安徽省实验动物中心提供. 大肠杆菌JM109由安徽医科大学分子生物学教研室提供. Trizol试剂盒、pSecTag2/Hygro B质粒(Invitrogen). 质粒小量提取试剂盒、 RT-PCR试剂盒(Promega);Ex Taq DNA聚合酶、T4 DNA连接酶,DNA Marker, pMD18-T Vector,限制性内切酶(TaKaRa).