【摘 要】
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目的:应用RNA干扰技术抑制结肠癌血管内皮生长因子(VEGF)表达.方法:将VEGF基因作为RNA干扰的靶区,通过E-RNAi网上提供的服务,设计两个特异的RNA干扰序列,将其装入含U6启动子
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院,重庆医科大学附属第二医院,重庆市第九人民医院,Molecular Oncology Laboratory The University of Chicago Medical
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目的:应用RNA干扰技术抑制结肠癌血管内皮生长因子(VEGF)表达.方法:将VEGF基因作为RNA干扰的靶区,通过E-RNAi网上提供的服务,设计两个特异的RNA干扰序列,将其装入含U6启动子的载体上,构建成抗VEGF基因的小发夹样RNA(shRNA)表达载体,再转染人结肠癌细胞HT29,通过RT-PCR、Northern blotting、免疫荧光和Western blotting,观察VEGF表达受抑的程度.结果:成功构建了两种抗VEGF基因的shRNA表达载体,RT-PCR、Northern blotting、免疫荧光和Western blotting,均发现其能明显抑制HT29细胞VEGF基因的表达,抑制率分别达42%、88%、73%和82%.结论:针对VEGF基因的shRNA表达载体能够明显抑制结肠癌细胞VEGF基因的表达.
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