【摘 要】
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目的 研究己酮可可碱对核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)诱导的牙龈间充质干细胞破骨细胞分化功能的抑制作用及其相关机制.方法 将获得牙龈间充质干细胞(MSCs)用RANKL刺激
【机 构】
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河北省中医院口腔科,河北省中医院检验科
【基金项目】
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河北省中医药管理局科研计划基金资助项目(2017053)。
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目的 研究己酮可可碱对核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)诱导的牙龈间充质干细胞破骨细胞分化功能的抑制作用及其相关机制.方法 将获得牙龈间充质干细胞(MSCs)用RANKL刺激后分为模型组和己酮可可碱(PTX)组,不进行RANKL刺激MSCs细胞作为空白对照组.4个质量浓度PTX组细胞分别用0.1,0.5,1.0和2.0 mg·mL-1的PTX(命名为0.1-PTX组,0.5-PTX组,1.0-PTX组和2.0-PTX组)处理2 h,模型组和空白对照组用等渗DMSO处理.用细胞计数法8测定细胞活力,抗酒石酸磷酸酶(TRAP)检测破骨细胞(OC)含量,蛋白质印迹法检测抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化抑制蛋白(p-IκB)、磷酸化抑制蛋白激酶α/β(p-IKKα/β)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达水平(灰度值).结果 模型组和4个质量浓度PTX组的细胞活力分别为(100.00±2.57)％,(98.14±2.48)％,(98.07±2.79)％,(76.32±2.21)％和(60.45±2.92)％;空白对照组、模型组、0.1-PTX组和0.5-PTX组的牙龈间充质干细胞的TRAP细胞数量分别为(3.36±0.24),(97.61±2.39),(66.87±2.12)和(42.35±1.46)个;这4组的成骨干细胞的TRAP细胞数量分别为(100.21±2.45),(467.13±5.63),(245.48±3.38)和(141.67±2.72)个;这4组p-Akt/Akt蛋白表达百分率分别为(100.43±2.59)％,(432.25±4.68)％,(307.31±2.63)％ 和(135.47±1.41)％;这4组p-IκBα/IκBα蛋白表达百分率分别为(100.36±2.32)％,(224.27±2.15)％,(171.45±1.58)％和(124.61±1.29)％.上述这5个指标:模型组与空白对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);不同质量浓度PTX组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 PTX通过抑制牙龈间充质干细胞破骨细胞谱系中RANKL诱导的核因子κB(NF-κB)和Akt活化,特异性地抑制破骨细胞的形成和存活.
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