【摘 要】
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从人胚肺成纤维细胞中提取总RNA，利用RT．PCR法获得人角质细胞生长因子．2（hKGF-2）cDNA，并通过PCR方法扩增，再与原核表达载体pET3c连接后转化至BL21（DE3）宿主细胞中获得表达菌株．通过流加
【机 构】
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吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,温州医学院药学院
【基金项目】
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吉林省教育厅“十一五”科技发展规划项目(批准号:吉教科合字2009第65号);长春市应用技术计划研究项目(批准号:08YZ45);2009年科技型中小企业技术创新基金(批准号:09C26212203306)
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从人胚肺成纤维细胞中提取总RNA，利用RT．PCR法获得人角质细胞生长因子．2（hKGF-2）cDNA，并通过PCR方法扩增，再与原核表达载体pET3c连接后转化至BL21（DE3）宿主细胞中获得表达菌株．通过流加补料方式和发酵条件的控制，进行高密度培养，并通过IPTG诱导获得可溶性表达的目的产物．结果表明：目的蛋白占菌体总蛋白的30．0％以上；经阳离子交换层析、肝素亲和层析两步柱层析方法获得的rhKGF-2纯度高于99．0％．建立了利用转受体FGFR2—11b的BaF3细胞株进行rhKGF-2促增殖作用
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