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【摘 要】目的:初步研究MicroRNA-223在乳腺癌中的相应信息情况。方法:选择2012年到2013年我院女性乳腺癌患者53例,以miR-223为检索词,在miRBase、TargetScan、Pictar三個数据库进行靶基因预测,将预测结果取交集。预测到可信度和准确性较高靶基因。以cDNA为模板,5sRNA为内对照,检测各细胞株miR-223相对表达水平。结果miR-223在各细胞株间的表达具有显著差异(F=84.945,P<0.001)。两两比较显示miR-223在特定细胞中表达最高,且显著高于其他参照细胞中的表达(P=0.001,P=0.002,P=0.010,P=0.005)。差异具有统计学意义。12例病患疾病产生进展,6例病患死亡。miR-223于疾病进展组表达(4.23±0.25),低于疾病未进展组(4.64±0.58),其中P=0.025,差异具有统计学意义(p<0.05)。在死亡组相应表达(3.81±0.56)低于未死亡组病患(4.57±0.42),其中P=0.004,差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:MicroRNA-223能够参与乳腺癌肿瘤的发生过程。
【关键词】miR-223;乳腺癌;转移
【文章编号】1004-7484(2014)05-3327-02
MicroRNAs(miRNAs)是进化保守的非编码单链RNA[1]。共18-24个核苷酸。由miRNAs基因在细胞核中转录为pri-miRNA,再经Drosha和Pasha加工成单链pre-miRNA。靶mRNA转录是由Ago-RNA诱导沉默复合体阻断[2]。这种不完全匹配打开了一个miRNA基因对应多个靶基因可能性。本文即对MicroRNA-223于乳腺癌的相关情况进行初步的研究分析,现报道如下:
1 资料和方法
1.1 选择2012年到2013年我院女性乳腺癌患者53例,年龄在40至82岁间,平均年龄58.2±3.5岁。另取12例健康者标本作为对照,年龄在41至83岁间,平均年龄59.1±1.3岁。以上各类数据资料差异无统计学意义(p>0.05)。具有可比性。
1.2 miR-223靶基因预测及生物信息学分析。 以miR-223为检索词,在miRBase、TargetScan、Pictar三个数据库进行靶基因预测,将预测结果取交集,即预测到可信度和准确性较高靶基因。
1.3 荧光定量PCR反应。 以cDNA为模板,5sRNA为内对照,检测各细胞株miR-223相对表达水平,反应体系混匀后,加反应后逆转录体系10μl,故总反应体系25μl。用Mx3000P定量PCR仪荧光定量PCR反应,检测各模板的Ct值,并进行数据处理,所有样品均重复3次。
1.4 统计学分析。 采用SPSS13.0统计软件进行数据分析。荧光定量PCR各种细胞△Ct值的比较采用单因素方差分析。
2 结果
2.1 利用荧光定量PCR检测miR-223在乳腺癌细胞株中的表达,以基础细胞为对照(mean±SD:1±0.000),单因素方差分析显示,miR-223在各细胞株间的表达具有显著差异(F=84.945,P<0.001)。两两比较显示miR-223在特定细胞中表达最高,且显著高于其他参照细胞中的表达(P=0.001,P=0.002,P=0.010,P=0.005)。差异具有统计学意义。
2.2 miR-223表达水平和疾病状态关系 对于53例乳腺癌患者实施随访,时间为4个月至92个月,平均随访时间为12个月。其中12例病患疾病产生进展,6例病患死亡。miR-223于疾病进展组表达(4.23±0.25),低于疾病未进展组(4.64±0.58),其中P=0.025,差异具有统计学意义(p<0.05)。在死亡组相应表达(3.81±0.56)低于未死亡组病患(4.57±0.42),其中P=0.004,差异具有统计学意义(p<0.05)。见下表-1:
3 结论
miRNAs在乳腺癌侵袭转移过程中有着非常重要的作用。其中一部分miRNAs对乳腺癌转移起促进作用,另外一些则起到抑制作用。Ma等最早发现miRNAs在乳腺癌转移过程中的作用:miR-10b 与乳腺癌的转移性/高度恶性相关,并且能够使非转移性乳腺癌肿瘤细胞获得强劲的浸润和转移能力[3]。进一步研究表明,miR-10b通过抑制靶基因HoxD10mRNA的翻译,从而增加转移基因RHOC的表达,促进了乳腺癌细胞的转移。随后Tavazzoied等发现miR-335通过作用于转录因子SOX4和tenascinC(一种细胞外基质成分)抑制迁徙和转移[4]。本文通过对MicroRNA-223的研究证明,FBXO8作为miR-223的靶基因,选择RHOB作为靶基因预测的鉴定。miR-223在特定细胞中表达最高,且显著高于其他参照细胞中的表达,差异具有统计学意义。且在53例乳腺癌患者中有12例病患疾病产生进展,6例病患死亡。miR-223于疾病进展组表达(4.23±0.25),低于疾病未进展组(4.64±0.58),其中P=0.025,差异具有统计学意义(p<0.05)。在死亡组相应表达(3.81±0.56)低于未死亡组病患(4.57±0.42),其中P=0.004,差异具有统计学意义(p<0.05)。综上所述,MicroRNA-223能够参与乳腺癌肿瘤的发生过程。
参考文献:
[1] Nicoloso MS,Spizzo R,Shimizu M,Rossi S,Calin GA.MicroRNAs-the micro steering wheel of tumor metastasis[J].Nature Rev Cancer,2009,9(3):293-302.
[2] Forstemann K,Horwich MD,Wee L,et al. Drosophila microRNAs are sorted into functionally distinct argonaute complexs after production by dicer-1[J].Cell,130(32):287-297.
[3] Filipowicz W,Bhattacharyya SN,Sonenberg N.Mechanisms of post-transcriptional regulation by microRNAs:are the answers in sight[J].Nature Rev Genet,2008,16(9):102-104.
[4] Doench JG,Petersen CP,Sharp PA.SiRNAs can function as miRNAs[J].Genes Dev,2003,17(4):438-442.
【关键词】miR-223;乳腺癌;转移
【文章编号】1004-7484(2014)05-3327-02
MicroRNAs(miRNAs)是进化保守的非编码单链RNA[1]。共18-24个核苷酸。由miRNAs基因在细胞核中转录为pri-miRNA,再经Drosha和Pasha加工成单链pre-miRNA。靶mRNA转录是由Ago-RNA诱导沉默复合体阻断[2]。这种不完全匹配打开了一个miRNA基因对应多个靶基因可能性。本文即对MicroRNA-223于乳腺癌的相关情况进行初步的研究分析,现报道如下:
1 资料和方法
1.1 选择2012年到2013年我院女性乳腺癌患者53例,年龄在40至82岁间,平均年龄58.2±3.5岁。另取12例健康者标本作为对照,年龄在41至83岁间,平均年龄59.1±1.3岁。以上各类数据资料差异无统计学意义(p>0.05)。具有可比性。
1.2 miR-223靶基因预测及生物信息学分析。 以miR-223为检索词,在miRBase、TargetScan、Pictar三个数据库进行靶基因预测,将预测结果取交集,即预测到可信度和准确性较高靶基因。
1.3 荧光定量PCR反应。 以cDNA为模板,5sRNA为内对照,检测各细胞株miR-223相对表达水平,反应体系混匀后,加反应后逆转录体系10μl,故总反应体系25μl。用Mx3000P定量PCR仪荧光定量PCR反应,检测各模板的Ct值,并进行数据处理,所有样品均重复3次。
1.4 统计学分析。 采用SPSS13.0统计软件进行数据分析。荧光定量PCR各种细胞△Ct值的比较采用单因素方差分析。
2 结果
2.1 利用荧光定量PCR检测miR-223在乳腺癌细胞株中的表达,以基础细胞为对照(mean±SD:1±0.000),单因素方差分析显示,miR-223在各细胞株间的表达具有显著差异(F=84.945,P<0.001)。两两比较显示miR-223在特定细胞中表达最高,且显著高于其他参照细胞中的表达(P=0.001,P=0.002,P=0.010,P=0.005)。差异具有统计学意义。
2.2 miR-223表达水平和疾病状态关系 对于53例乳腺癌患者实施随访,时间为4个月至92个月,平均随访时间为12个月。其中12例病患疾病产生进展,6例病患死亡。miR-223于疾病进展组表达(4.23±0.25),低于疾病未进展组(4.64±0.58),其中P=0.025,差异具有统计学意义(p<0.05)。在死亡组相应表达(3.81±0.56)低于未死亡组病患(4.57±0.42),其中P=0.004,差异具有统计学意义(p<0.05)。见下表-1:
3 结论
miRNAs在乳腺癌侵袭转移过程中有着非常重要的作用。其中一部分miRNAs对乳腺癌转移起促进作用,另外一些则起到抑制作用。Ma等最早发现miRNAs在乳腺癌转移过程中的作用:miR-10b 与乳腺癌的转移性/高度恶性相关,并且能够使非转移性乳腺癌肿瘤细胞获得强劲的浸润和转移能力[3]。进一步研究表明,miR-10b通过抑制靶基因HoxD10mRNA的翻译,从而增加转移基因RHOC的表达,促进了乳腺癌细胞的转移。随后Tavazzoied等发现miR-335通过作用于转录因子SOX4和tenascinC(一种细胞外基质成分)抑制迁徙和转移[4]。本文通过对MicroRNA-223的研究证明,FBXO8作为miR-223的靶基因,选择RHOB作为靶基因预测的鉴定。miR-223在特定细胞中表达最高,且显著高于其他参照细胞中的表达,差异具有统计学意义。且在53例乳腺癌患者中有12例病患疾病产生进展,6例病患死亡。miR-223于疾病进展组表达(4.23±0.25),低于疾病未进展组(4.64±0.58),其中P=0.025,差异具有统计学意义(p<0.05)。在死亡组相应表达(3.81±0.56)低于未死亡组病患(4.57±0.42),其中P=0.004,差异具有统计学意义(p<0.05)。综上所述,MicroRNA-223能够参与乳腺癌肿瘤的发生过程。
参考文献:
[1] Nicoloso MS,Spizzo R,Shimizu M,Rossi S,Calin GA.MicroRNAs-the micro steering wheel of tumor metastasis[J].Nature Rev Cancer,2009,9(3):293-302.
[2] Forstemann K,Horwich MD,Wee L,et al. Drosophila microRNAs are sorted into functionally distinct argonaute complexs after production by dicer-1[J].Cell,130(32):287-297.
[3] Filipowicz W,Bhattacharyya SN,Sonenberg N.Mechanisms of post-transcriptional regulation by microRNAs:are the answers in sight[J].Nature Rev Genet,2008,16(9):102-104.
[4] Doench JG,Petersen CP,Sharp PA.SiRNAs can function as miRNAs[J].Genes Dev,2003,17(4):438-442.