p35^Nch5a基因重复性找靶载体的构建和ES细胞基因打靶研究

来源 :遗传学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：angwjif

【摘要】

：

为了在小鼠胚胎干细胞（ＥＳ）中引起神经细胞ｃｄｃ２类激酶调节亚基ｐ３５＾Ｎｃｋ５ａ基因的定点重复，采用常规的分子克隆技术，构建得到长约１２．２ｋｂ的基因重复性找靶ｐＧＤＴＶ。用电穿孔法将线性化的ｐＧＤＴＶ载体转入ＥＳ细胞，经过Ｇ４１８和ＧＡＮＣ分组药物

【作者】

：

周常文薛红等香

【机构】

：

第二军医大学医学遗传学教研室,港科技大学生物化学系

【出处】

：

遗传学报

【发表日期】

：

2000年8期

【关键词】

：

p35^Nch5a基因基因打靶基因重复 NclK NFTS AD p35~(Nck5a) gene gene targeting embryonic ste

【基金项目】

：

国家自然科学基金重点项目!（39830360）,,军队九五重点攻关课题!（96Z033）,,上海市生命科学研究中心课题!（95JC

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为了在小鼠胚胎干细胞（ＥＳ）中引起神经细胞ｃｄｃ２类激酶调节亚基ｐ３５＾Ｎｃｋ５ａ基因的定点重复，采用常规的分子克隆技术，构建得到长约１２．２ｋｂ的基因重复性找靶ｐＧＤＴＶ。用电穿孔法将线性化的ｐＧＤＴＶ载体转入ＥＳ细胞，经过Ｇ４１８和ＧＡＮＣ分组药物选择，获得２４５个双药物抗性的细胞克隆，细胞存活率为６．２２×１０＾－５。经ＰＣＲ和基因组Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定，２个ＥＳ细胞克隆发生了ｐ３５＾Ｎ

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