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目的:构建含D-氨基酸氧化酶(DAAO)基因的重组逆转录病毒载体,初步观察DAAO基因的功能。方法:利用重组DNA技术将DAAOcDNA亚克隆至逆转录病毒载体(pLDAAOSN)中,以磷酸钙沉淀法介导转染包装细胞ΦXNA,用NIH3T3细胞测定病毒滴度,将重组逆转录病毒感染K562白血病细胞,G418筛选出抗性克隆,命名为KDAAO。PCR、原位杂交分析外源基因整合和表达,观察50mm/LD-丙氨酸对KDAAO杀伤作用。结果:经酶切鉴定和DNA测序证明重组逆转录病毒载体中含有完整的DAAO基因。包装细胞产