【摘 要】
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目的在体外人神经细胞瘤细胞株(SK-N-AS)中,以二恶英(TCDD)、三甲基胆蒽(3-MC)作为诱导化合物,探讨多环芳烃受体(AHR、ARNT)基因与细胞色素P4501A1/1B1(CYP1A1、CYP1B1)基因
【机 构】
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中山大学公共卫生学院预防医学系,美国国家毒理研究中心(National Center for Toxicological Research
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目的在体外人神经细胞瘤细胞株(SK-N-AS)中,以二恶英(TCDD)、三甲基胆蒽(3-MC)作为诱导化合物,探讨多环芳烃受体(AHR、ARNT)基因与细胞色素P4501A1/1B1(CYP1A1、CYP1B1)基因表达的调控,并研究其剂量反应关系和时间反应关系.方法用常规的细胞培养方法,用二甲基亚砜(DMSO)、5.0、50.0、100.0 nmol/L TCDD和0.1、1.0、10.0 μmol/L 3-MC处理细胞12 h、24 h、48 h、72 h,利用提纯RNA和合成cDNA的药盒,合成cDNA,然后通过逆转录聚合酶反应(RT-PCR)表达AHR、ARNT和CYP1A1、CYP1B1基因,以β-actin作为内对照,分析不同处理剂量、时间时基因表达的强度.结果 4种基因在SK-N-AS中都有基本的表达,TCDD在50.0 nmol/L 以上,染毒处理48 h、72 h,对AHR、ARNT及CYP1A1基因表达都有上调作用;5.0 nmol/L组在染毒处理72 h后对AHR基因表达,50.0和100.0 nmol/L组分别在染毒处理72 h和48 h时对CYP1B1基因表达也有上调作用;3-MC 1.0、10.0 μmol/L在染毒72 h后对AHR、ARNT、CYP1A1基因表达有上调作用,其中10.0 μmol/L组在染毒48 h后就有上调作用,但对CYP1B1基因表达上调仅仅在10.0 μmol/L染毒48 h组.结论本研究结果提示,TCDD、3-MC两种多环芳烃类化合物在SK-N-AS中,在一定剂量和一定时间状态下对AHR、ARNT、CYP1A1及CYP1B1都有调控作用.
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