【摘 要】
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目的建立并优化大疱性类天疱疮（BP）抗BP180NC16A IgG抗体亚型的酶联免疫吸附试验（ELISA）检测方法，评估其敏感性和特异性。方法通过在大肠杆菌中表达并纯化GSTBP180NC16A重组蛋白，建立抗BP180NC16A IgG亚型的ELISA检测方法，检测2009至2012年北京协和医院136例BP患者血清中抗体水平，以20名健康体检者血清作为对照；阳性界值为健康对照血清测得的均值加3
【机 构】
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100730中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院皮肤科,100730中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院皮肤科,100730中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院皮肤科,100730中国医学
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目的建立并优化大疱性类天疱疮（BP）抗BP180NC16A IgG抗体亚型的酶联免疫吸附试验（ELISA）检测方法，评估其敏感性和特异性。
方法通过在大肠杆菌中表达并纯化GSTBP180NC16A重组蛋白，建立抗BP180NC16A IgG亚型的ELISA检测方法，检测2009至2012年北京协和医院136例BP患者血清中抗体水平，以20名健康体检者血清作为对照；阳性界值为健康对照血清测得的均值加3倍标准差，高于该界值的判断为阳性。并利用Western印迹法检测其中4种抗体均阳性的患者血清，和ELISA方法进行比较。
结果ELISA法检测的特异性IgG1、IgG2、IgG3和IgG4的阳性界值分别为0.113、0.196、0.154和0.120，20名健康对照4种IgG亚型检测值均低于阳性界值水平，使本检测方法特异性较好。136例患者抗BP180NC16A IgG1、IgG2、IgG3及IgG4抗体亚型阳性率分别为67.6%（92/136）、45.6%（62/136）、50.7%（69/136）和54.4%（74/136）；其中4种IgG亚型均阳性者29例，占21.3%；至少一种IgG亚型为阳性者112例，占82.4%，即4种亚型综合敏感度为82.4%。而Western印迹检测20例经ELISA证实4种IgG亚型抗体均阳性的患者血清显示IgG1和IgG4阳性人数分别为15、14例。
结论本研究建立的ELISA方法的特异性较好，敏感性尚需进一步提高。
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