硫酸软骨素酶ABCⅠ分泌型真核表达质粒的构建

来源 :中国现代神经疾病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：stonefountain

【摘要】

：

目的建立硫酸软骨素酶ABCⅠ（ChABCⅠ）的分泌型真核表达载体，并在胶质瘤细胞系中对其表达情况进行观察。方法以真核表达载体pCDNA3．1／V5／HISA为载体，将基底膜40蛋白信号肽编码区和ChA

【作者】

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高慧玲王虔于士柱陈秀菊孙翠云安同岭

【机构】

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天津医科大学总医院

【出处】

：

中国现代神经疾病杂志

【发表日期】

：

2010年4期

【关键词】

：

软骨素硫酸酶类质粒转染神经胶质瘤免疫印迹法 Chondroitinsulfatases Plasmids Transfection Glioma

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目的建立硫酸软骨素酶ABCⅠ（ChABCⅠ）的分泌型真核表达载体，并在胶质瘤细胞系中对其表达情况进行观察。方法以真核表达载体pCDNA3．1／V5／HISA为载体，将基底膜40蛋白信号肽编码区和ChABCⅠ成熟肽段编码区串联插入其多克隆位点，构建分泌型真核表达质粒pCDNA—BMS-CABCⅠ。采用该质粒转染人胶质瘤细胞系TJ905，培养3d后将培养液上清液行SDS-PAGE和免疫印迹分析。结果考马斯亮蓝染色显示有新条带出现，条带的相对分子质量大小与理论值一致，免疫印迹检测显示有v5免疫反应性特异性条带出

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