目的 观察核转录因子-κB抑制蛋白激酶(IKKβ)小干扰RNA(siRNA)对耐替莫唑胺(TMZ)的胶质瘤细胞株TR-U251和TR-LN229增殖的影响,探讨IKKβ干扰在耐药细胞TMZ化疗敏感性中的作用.方法 体外分步诱导法建立TMZ耐药细胞株TR-U251和TR-LN229,分别用25、50、100 μmol/L siRNA转染耐药细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法鉴定IKKβ mRNA表达量;噻唑蓝(MTT)法测定50 μmol/L IKKβ siRNA干扰前后各组细胞TMZ半数抑制浓度(IC50)值并计算耐药指数;转染50 μmol/L IKKβ siRNA的耐药细胞分别联合或不联合IC20TMZ,MTT法检测细胞的增殖抑制率.结果 25 μmol/L IKKβ siRNA干扰效果最弱,50μmol/L和100 μmol/L效果较强;进行50 μmol/L IKKβ siRNA干扰24 h,TR-U251干扰前后对TMZ耐药指数分别为5.92±0.66和0.45±0.07;TR-LN229干扰前后分别为6.58 ±0.29和0.22±0.10;50 μmol/L IKKβ siRNA单独作用TR-U251和TR-LN229细胞48 h增殖抑制率分别为(17.47±4.11)%、(5.90±2.81)%,120μmol/LTMZ单独作用TR-U251 48 h细胞增殖抑制率为(7.87±3.29)%,60 μmol/L TMZ单独作用TR-LN229 48 h细胞增殖率为(24.67±5.37)%,而IKKβ干扰与TMZ联合作用48 h,TR-U251和TR-LN229细胞增殖抑制率分别为(66.33±9.18)%、(75.30±6.01)%.结论 IKKβ RNA干扰显著降低TR-U251与TR-LN229对TMZ的耐药指数及增殖率,增加TMZ化疗的敏感性。
核转录因子-κB抑制蛋白激酶小分子干扰RNA增强人胶质瘤细胞替莫唑胺化疗敏感性
【摘 要】
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目的 观察核转录因子-κB抑制蛋白激酶(IKKβ)小干扰RNA(siRNA)对耐替莫唑胺(TMZ)的胶质瘤细胞株TR-U251和TR-LN229增殖的影响,探讨IKKβ干扰在耐药细胞TMZ化疗敏感性中的作用.方法 体外分步诱导法建立TMZ耐药细胞株TR-U251和TR-LN229,分别用25、50、100 μmol/L siRNA转染耐药细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法鉴定IKKβ m
【机 构】
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300060天津市环湖医院神经外科,300060天津市环湖医院神经外科,300060天津市环湖医院神经外科
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2013年30期
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