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目的构建人肿瘤坏死因子（hTNF-α）表达质粒，并对其进行鉴定，优化hTNF—α蛋白表达条件使之在大肠埃希菌中实现高效表达。方法应用PCR扩增技术获得hTNF-α基因片段并进行相应的鉴定，将鉴定后的hTNPa基因克隆到pET24a载体中，获得pET24a—hTNF-α表达质粒。将此质粒转化入大肠埃希菌BL21（DE3）中，并对其表达条件进行优化。结果成功构建了pET24a-hTNF-α质粒，PCR和酶切技术进行鉴定，结果显示与目的片段一致。将此质粒转入大肠埃希菌BL21（DE3）中，得到最佳表达条件为：M