microRNA-1271-5p靶向FOXQ1抑制宫颈鳞状细胞癌细胞的迁移和侵袭

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目的 探究miR-1271-5p对宫颈鳞状细胞癌 ( cervical squamous cell carcinoma, CSCC) 细胞迁移和侵袭能力的影响, 初步阐明miR-1271-5p对癌基因叉头框蛋白Q1 ( forkhead box Q1, FOXQ1) 的靶向调控机制.方法 收集2018年1月至2018年10月在华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院行手术切除的41例CSCC患者的癌和癌旁组织标本, 应用RT-qPCR检测组织中miR-1271-5p和FOXQ1 mRNA的表达水平, 分析miR-1271-5p和FOXQ1 mRNA表达的相关性; RT-qPCR检测 miR-1271-5p和 FOXQ1 mRNA在人CSCC细胞株 (SiHa和CaSki) 及人宫颈永生化鳞状细胞株 ( End1/E6E7) 中的表达水平; 应用miR-1271-5p模拟物转染SiHa细胞, 分别采用划痕实验和Transwell小室检测miR-1271-5p对细胞迁移和侵袭能力的影响; 采用Western印迹检测miR-1271-5p对FOXQ1、 E-cadherin和Vimentin蛋白表达水平的影响; 最后, 应用双荧光素酶报告基因验证miR-1271-5p对FOXQ1的靶向调控作用.结果 miR-1271-5p在CSCC组织中的表达水平显著低于癌旁组织 (P<0.001), 在人CSCC细胞株 (SiHa和CaSki) 中的表达水平也均低于人宫颈永生化鳞状细胞株 (End1/E6E7) (P<0.001); 与转染阴性对照细胞比较, 转染miR-1271-5p模拟物的SiHa细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制 (P<0.05). FOXQ1 mRNA和蛋白在CSCC组织中的表达水平均显著高于癌旁组织 (P<0.001), 相关性分析显示, FOXQ1 mRNA的表达水平与miR-1271-5p呈负相关 (r = -0.612, P<0.001).在转染miR-1271-5p模拟物后, SiHa中FOXQ1和Vimentin蛋白表达水平均降低, 而E-cadherin蛋白表达增高.双荧光素酶报告基因试验确认miR-1271-5p可通过与FOXQ1 mRNA的3′-非翻译区 (3′-untranslated re-gion, 3′UTR) 直接结合, 靶向调控FOXQ1的表达.结论 miR-1271-5p在CSCC中表达下调, 其可通过靶向抑制FOXQ1的表达调节细胞的上皮间质转化状态, 从而抑制CSCC细胞的迁移和侵袭.
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