【摘 要】
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目的构建干扰表皮生长因子受体（EGFR）的pSilencer^TM-EGFR表达质粒，转染入非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞株，为观察对EGFR的沉默效应奠定基础。方法①根据人类EGFR的mRNA序列，设计4条
【机 构】
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南昌大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,南昌大学第二附属医院分子中心,江西省人民医院ICU
【基金项目】
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国家自然科学基金(30360035)
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目的构建干扰表皮生长因子受体（EGFR）的pSilencer^TM-EGFR表达质粒，转染入非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞株，为观察对EGFR的沉默效应奠定基础。方法①根据人类EGFR的mRNA序列，设计4条干扰片段，以pSilencer^TM2.1-U6-hygro质粒为载体，构建shRNA重组体，转化入DH5α大肠杆菌，提取质粒，进行酶切和测序鉴定；②采用脂质体2000分别转染人类非小细胞肺癌细胞株A549，用潮霉素（Hygromycin B）筛选阳性克隆。结果①经酶切及测序鉴定，成功构建了针
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