【摘 要】
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目的 探讨生长抑素(SST)在肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)中的表达水平及其对肝癌的影响及作用机制.方法 随机收集83例空军军医大学第一附属医院肝癌手术患者的癌组织及癌旁组织,采用qPCR检测组织中分离培养的CAFs和正常成纤维细胞(NFs)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)和SST的表达水平,并分析SST与肝癌患者临床病理参数及预后的关系.CAFs转染SST的过表达质粒后,取其上清培养液与肝癌细胞共培养,CCK-8实验、Transwell和Western blot分别用来检
【机 构】
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710032 陕西西安 空军军医大学第一附属医院消化内科
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目的 探讨生长抑素(SST)在肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)中的表达水平及其对肝癌的影响及作用机制.方法 随机收集83例空军军医大学第一附属医院肝癌手术患者的癌组织及癌旁组织,采用qPCR检测组织中分离培养的CAFs和正常成纤维细胞(NFs)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)和SST的表达水平,并分析SST与肝癌患者临床病理参数及预后的关系.CAFs转染SST的过表达质粒后,取其上清培养液与肝癌细胞共培养,CCK-8实验、Transwell和Western blot分别用来检测肝癌(HCC)细胞增殖、侵袭和Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达水平.酶联免疫吸附试验(ELISA)用来检测CAFs培养液上清中趋化因子的含量.Kaplan-Meier法被用来评估SST对肝癌患者生存率的影响.结果 与NFs相比,α-SMA(2.87±0.091)和Vimentin(2.93±0.085)的表达水平在CAFs中显著增加,而SST(0.328±0.073)的表达水平显著降低(t=26.441,P=0.001;t=30.886,P=0.001;t=11.197,P=0.001).临床病理特征分析显示SST的表达与肝癌患者TNM分期、淋巴结是否转移和组织分化程度有关,差异均有统计学意义(χ2=5.562,P=0.001;χ2=24.688,P=0.001;χ2=18.685,P=0.001).CAFs的上清培养液可显著促进肝癌细胞的增殖与侵袭,而过表达SST的CAFs的上清培养液可抑制CAFs对肝癌细胞的增殖与侵袭的促进作用.ELISA结果显示,趋化因子CCL2(98.50±3.98)pg/mL、CCL5(78.32±4.21)pg/mL、CXCL21(24.32±5.11)pg/mL和CXCL25(20.34±4.77)pg/mL的表达水平在CAFs上清液中的表达水平显著高于NFs组(3.2±5.36,1.40±4.35,1.02±4.67,1.11±5.01)pg/mL,差异均具有统计学意义(F=78.324,P=0.001;F=53.611,P=0.001;F=32.847,P=0.001;F=25.635,P=0.001).过表达SST后,可显著抑制四种趋化因子的表达水平和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达,差异具有统计学意义(F=15.951,P=0.001;F=13.806,P=0.001;F=17.824,P=0.001;F=18.347,P=0.001).高表达SST的肝癌患者的无进展生存率(χ2=4.679,P=0.031)和总生存率(χ2=4.304,P=0.038)均高于低表达患者.结论 SST在CAFs中表达下调,过表达SST的CAFs上清培养液通过抑制CAFs分泌的趋化因子和Wnt/β-catenin信号通路来抑制肝癌细胞的增殖与侵袭.
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