【摘 要】
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目的 通过siRNA的方法体内靶向抑制哮喘小鼠T细胞非受体酪氨酸蛋白激酶Lck的基因表达,研究Lck特异性siRNA对哮喘小鼠的治疗作用.方法 化学法合成小鼠T细胞Lck基因特异的siRNA
【机 构】
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东阳市人民医院呼吸内科,复旦大学附属中山医院实验研究中心
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目的 通过siRNA的方法体内靶向抑制哮喘小鼠T细胞非受体酪氨酸蛋白激酶Lck的基因表达,研究Lck特异性siRNA对哮喘小鼠的治疗作用.方法 化学法合成小鼠T细胞Lck基因特异的siRNA片段,以in vivo-jetPEITM作为转染试剂,将合成的RNA片段与转染试剂混合后通过尾静脉注射到哮喘小鼠体内,48 h后处死小鼠,ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子IL-4、IL-17的含量；HE染色观察肺组织病理改变情况；免疫组织化学法检测肺组织中Lck表达的变化；Western Blot法检测肺组织匀浆中Lck蛋白的含量.结果 SiRNA干扰组哮喘小鼠BALF中IL-4、IL-17[( 142.62±15.57) pg/ml,(74.18 ±5.36)pg/ml]的水平较哮喘组[(234.68±11.15) pg/ml,(96.76±8.28) pg/ml]明显下降(P＜0.01),肺组织炎症病理改变有所减轻,免疫组化提示肺组织中Lck蛋白表达下降,肺组织匀浆中Lck蛋白的表达下降(P＜0.05).结论 Lck特异性siRNA可以降低哮喘小鼠肺组织中炎症因子IL-4、IL-17的水平,减轻肺部炎症反应,具有一定的治疗作用.
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