初步探索Toll样受体（TLR）/NO通路在高危型HPV阳性的子宫颈癌组织和细胞中的表达及意义。
方法（1）选取2012年11月1日至2013年5月20日在复旦大学附属妇产科医院就诊的高危型HPV阳性的子宫颈鳞癌患者（宫颈癌组）及经病理检查诊断为正常子宫颈的高危型HPV阳性患者（对照组）各36例，Greiss法检测两组患者宫颈管NO含量；免疫组化SP法检测两组患者子宫颈组织中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白的表达；激光显微切割（LCM）技术获取两组患者子宫颈组织中的鳞状上皮细胞，采用逆转录（RT）-PCR技术检测所获鳞状上皮细胞中TLR/NO通路中关键基因[包括TLR3、TLR4、TLR7、TLR8、TLR9、核因子κB（NF-κB）p65、iNOS]mRNA的表达水平；将宫颈癌组和对照组中表达差异最为显著的TLR（为TLR4）用于后续研究。（2）选用子宫颈癌细胞系CaSki（HPV16阳性）、HeLa（HPV18阳性）和C33a（HPV阴性），采用RT-PCR技术和蛋白印迹法（western blot）分别检测CaSki、HeLa和C33a细胞中TLR4、NF-κBp65、iNOS mRNA和蛋白的表达，采用细胞免疫荧光法检测CaSki、HeLa和C33a细胞中TLR4蛋白的表达。
结果（1）宫颈癌组宫颈管NO含量为（42.92±0.36）μmol/L，对照组为（15.49±0.24）μmol/L，两组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。宫颈癌组和对照组子宫颈组织中iNOS蛋白的阳性表达率分别为75%（27/36）、6%（2/36），两组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；iNOS蛋白的表达与子宫颈鳞癌患者年龄、肿瘤大小和临床分期无关（P>0.05）；而与有无淋巴结转移、淋巴血管浸润明显相关（P<0.05）。宫颈癌组子宫颈组织鳞状上皮细胞中TLR3、TLR4、TLR7、TLR8、NF-κBp65、iNOS mRNA的表达水平分别为4.80±0.32、7.41±0.39、2.90±0.14、2.02±0.26、3.09±0.16、2.88±0.17，对照组分别为1.21±0.12、1.86±0.21、1.25±0.11、1.22±0.14、0.48±0.15、0.27±0.11，宫颈癌组均高于对照组，分别比较，差异均有统计学意义（P<0.05），其中宫颈癌组与对照组中表达差异最为显著者为TLR4；而两组间TLR9 mRNA表达水平（分别为0.79±0.05、0.93±0.07）比较，差异则无统计学意义（P>0.05）。（2）RT-PCR技术和蛋白印迹法检测显示，HeLa和CaSki细胞中TLR4、NF-κBp65和iNOS mRNA和蛋白的表达水平均高于C33a细胞，分别比较，差异均有统计学意义（P< 0.05）。细胞免疫荧光法检测显示，HeLa、CaSki、C33a细胞中TLR4蛋白表达水平（以积分吸光度表示）分别为3 599±427、2 080±456、730±96，两两比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。
结论高危型HPV阳性的子宫颈癌组织和细胞中TLR4/NO通路关键基因表达水平增高，推测TLR4/NO通路激活可能参与了高危型HPV感染所致子宫颈癌的形成过程。