论文部分内容阅读
摘要目的： 建立HPLC法测定在阿酚咖敏片中马来酸氯苯那敏的含量。方法：色谱柱为 Agilent C18（ 250mm×4.6 mm, 5μm），流动相为乙腈-0.3%十二烷基硫酸钠溶液-磷酸（60：40-0.02）（用三乙胺调节pH至3.3），流速1.0 ml•min-1，检测波长为215 nm，采用外标法计算含量。结果：本法简便可靠、灵敏、准确，马来酸氯苯那敏在17.61～27.12μg•ml-1范围内呈良好的线性关系（r=0.9998）,平均加样回收率为99.86%，RSD为0.36%(n=9)。结论：建立的定量方法专属性强，可用于阿酚咖敏片中马来酸氯苯那敏的含量。
关键词：高效液相色谱；阿酚咖敏片；马来酸氯苯那敏；含量测定
阿酚咖敏片中含有马来酸氯苯那敏、阿司匹林、对乙酰氨基酚、咖啡因以及赋形剂等成分，是临床中常用的一种抗感冒型药物。本文应用HPLC测定法来检测阿酚咖敏片中马来酸氯苯那敏的含量，该测定方法操作简单、准确性高、测定结果快速可靠，是临床药物质量检测中的有效方法。
一、仪器、试剂与样品
高效液相色谱仪；氨酚咖那敏片中6批（吉林A厂，批号为：120402，120612，120103；辽宁B厂，批号为：121217，110603，110805）；去离子水，乙腈（色谱纯，进口Agilent），十二烷基硫酸钠（分析纯 国药集团化学试剂有限公司），磷酸（优级纯 北京化工厂），三乙胺（分析纯，汕头市西陇化工厂有限公司）。
二、方法和结果
1、溶液的制备
1.1对照品制备将马来酸氯苯那敏在105℃干燥3小时，精密称定11.81mg，放置于50ml的量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得，存于冰箱中冷藏保管，留作待用。
1.2供试品制备取20片阿酚咖敏片，将其研磨细粉，放置于50ml的量瓶中，采用对照品溶液制备的相同溶解于稀释方法，后经滤过可得，备用。
1.3阴性对照溶液制备按照处方原有成分比例，去除马来酸氯苯那敏成分，制备阴性样品溶液，溶液制备方法如供试品制备方法。
2色谱条件和系统适用性的试验 色谱柱取：250mm×4.6 mm, 5μm；流动相为：乙腈-0.3%十二烷基硫酸钠溶液-磷酸（60：40-0.02）（用三乙胺调节pH至3.3）；流速1.0 ml•min-1；波长为215 nm；柱温30℃；进样体积：20μl；此种色谱检测条件的马来酸、氯苯那敏理论塔板数 分别是7185、16133，保留时间分别为2.10 min、7.39min。应用以上色谱检测条件下，对照溶液、供试品溶液、阴性对照溶液的检测图谱如图1，图1显示马来酸氯苯那敏的分离效果好，峰形显示对称，而阴性对照溶液在此条件下没有显示出吸收峰。
A
B
C
图1 阴性样品(A)、对照品（B）、样品（C）的色谱图
1 马来酸（保留时间，2.06min）2氯苯那敏（保留时间，10.29min）
3线性关系试验精密吸取上述对照品储备液3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0ml，放置于50ml的量瓶中，采用对照品溶液相同的制备方法，同时按照以上相同的色谱测定条件，分别取对照溶液、供试品溶液、阴性对照溶液20μl，进行峰面面的测定，
设定峰面面积A，以对照品的溶液浓度进行作图图，其回归方程为：
A=3.9C-1.483 r=0.9989
根据色谱检测的结果，说明在17.61～27.12μg•ml-1浓度的马来酸氯苯那敏的线性关系良好。
4、精密度的检测试验根据检测结果中，取对照品浓度范围内的24.25μg•ml-1浓度的溶液，应用以上色谱检测条件下重复检测6次，对其检测面积进行测定，RSD值是0.09%。
5、重复性试验 应用同样的溶液制备方法以及色谱检测条件对5份供试品溶液进行重复试验，对其峰面积进行检测，计算马来酸氯苯那敏的精确含量，RSD是0.31%
6、稳定性检测 对同一批号的供试品溶液进行稳定性的检测，每4小时进行一次检测，共实施6次，检测结果RSD为0.34%，结果说明一天内的供试品溶液的稳定性高
7、加样的回收率试验 n=9取（0.2342mg•ml-1）样品溶液2.5ml，共9份，置50ml量瓶中，分别精密加对照品溶液低、中、高3个量（0.4724，0.5905，0.7086mg）各3份，溶液制备方法及色谱条件如上文，结果表明加样平均回收率为99.79%；RSD为0.35%。
8、样品的测定将不同批号样品制备成试品溶液（制备方法如上问“1.2”），采用上文的色谱条件，对峰面积进行测定，计算马来酸氯苯那敏的精确含量，共6批样品，每批进行测定3份，测定结果（标示量%，n=3）99.599.198.7
100.2 101.0 100.9
三、 讨论
化学药品地方标准上升国家标准[1]无马来酸氯苯那敏的含量測定。本文应用HPLC测定法来检测阿酚咖敏片中马来酸氯苯那敏的含量，该测定方法操作简单、准确性高、测定结果快速可靠，建立的定量方法专属性强，可用于阿酚咖敏片的生产质量控制。
参考文献：
[1] 国家食品药品监督管理局标准化学药品地方标准上升国家标准（第三册）WS-10001-(HD-0236)-2002.
[2] 池浩波,曾伟杰.HPLC法测定咳特灵胶囊(片)中马来酸氯苯那敏的含量[J].广东药学.2003(04)：304.
[3] 王启砚.咳特灵胶囊中马来酸氯苯那敏的含量测定[J].药物分析杂志.2001(01)：56.
关键词：高效液相色谱；阿酚咖敏片；马来酸氯苯那敏；含量测定
阿酚咖敏片中含有马来酸氯苯那敏、阿司匹林、对乙酰氨基酚、咖啡因以及赋形剂等成分，是临床中常用的一种抗感冒型药物。本文应用HPLC测定法来检测阿酚咖敏片中马来酸氯苯那敏的含量，该测定方法操作简单、准确性高、测定结果快速可靠，是临床药物质量检测中的有效方法。
一、仪器、试剂与样品
高效液相色谱仪；氨酚咖那敏片中6批（吉林A厂，批号为：120402，120612，120103；辽宁B厂，批号为：121217，110603，110805）；去离子水，乙腈（色谱纯，进口Agilent），十二烷基硫酸钠（分析纯 国药集团化学试剂有限公司），磷酸（优级纯 北京化工厂），三乙胺（分析纯，汕头市西陇化工厂有限公司）。
二、方法和结果
1、溶液的制备
1.1对照品制备将马来酸氯苯那敏在105℃干燥3小时，精密称定11.81mg，放置于50ml的量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得，存于冰箱中冷藏保管，留作待用。
1.2供试品制备取20片阿酚咖敏片，将其研磨细粉，放置于50ml的量瓶中，采用对照品溶液制备的相同溶解于稀释方法，后经滤过可得，备用。
1.3阴性对照溶液制备按照处方原有成分比例，去除马来酸氯苯那敏成分，制备阴性样品溶液，溶液制备方法如供试品制备方法。
2色谱条件和系统适用性的试验 色谱柱取：250mm×4.6 mm, 5μm；流动相为：乙腈-0.3%十二烷基硫酸钠溶液-磷酸（60：40-0.02）（用三乙胺调节pH至3.3）；流速1.0 ml•min-1；波长为215 nm；柱温30℃；进样体积：20μl；此种色谱检测条件的马来酸、氯苯那敏理论塔板数 分别是7185、16133，保留时间分别为2.10 min、7.39min。应用以上色谱检测条件下，对照溶液、供试品溶液、阴性对照溶液的检测图谱如图1，图1显示马来酸氯苯那敏的分离效果好，峰形显示对称，而阴性对照溶液在此条件下没有显示出吸收峰。
A
B
C
图1 阴性样品(A)、对照品（B）、样品（C）的色谱图
1 马来酸（保留时间，2.06min）2氯苯那敏（保留时间，10.29min）
3线性关系试验精密吸取上述对照品储备液3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0ml，放置于50ml的量瓶中，采用对照品溶液相同的制备方法，同时按照以上相同的色谱测定条件，分别取对照溶液、供试品溶液、阴性对照溶液20μl，进行峰面面的测定，
设定峰面面积A，以对照品的溶液浓度进行作图图，其回归方程为：
A=3.9C-1.483 r=0.9989
根据色谱检测的结果，说明在17.61～27.12μg•ml-1浓度的马来酸氯苯那敏的线性关系良好。
4、精密度的检测试验根据检测结果中，取对照品浓度范围内的24.25μg•ml-1浓度的溶液，应用以上色谱检测条件下重复检测6次，对其检测面积进行测定，RSD值是0.09%。
5、重复性试验 应用同样的溶液制备方法以及色谱检测条件对5份供试品溶液进行重复试验，对其峰面积进行检测，计算马来酸氯苯那敏的精确含量，RSD是0.31%
6、稳定性检测 对同一批号的供试品溶液进行稳定性的检测，每4小时进行一次检测，共实施6次，检测结果RSD为0.34%，结果说明一天内的供试品溶液的稳定性高
7、加样的回收率试验 n=9取（0.2342mg•ml-1）样品溶液2.5ml，共9份，置50ml量瓶中，分别精密加对照品溶液低、中、高3个量（0.4724，0.5905，0.7086mg）各3份，溶液制备方法及色谱条件如上文，结果表明加样平均回收率为99.79%；RSD为0.35%。
8、样品的测定将不同批号样品制备成试品溶液（制备方法如上问“1.2”），采用上文的色谱条件，对峰面积进行测定，计算马来酸氯苯那敏的精确含量，共6批样品，每批进行测定3份，测定结果（标示量%，n=3）99.599.198.7
100.2 101.0 100.9
三、 讨论
化学药品地方标准上升国家标准[1]无马来酸氯苯那敏的含量測定。本文应用HPLC测定法来检测阿酚咖敏片中马来酸氯苯那敏的含量，该测定方法操作简单、准确性高、测定结果快速可靠，建立的定量方法专属性强，可用于阿酚咖敏片的生产质量控制。
参考文献：
[1] 国家食品药品监督管理局标准化学药品地方标准上升国家标准（第三册）WS-10001-(HD-0236)-2002.
[2] 池浩波,曾伟杰.HPLC法测定咳特灵胶囊(片)中马来酸氯苯那敏的含量[J].广东药学.2003(04)：304.
[3] 王启砚.咳特灵胶囊中马来酸氯苯那敏的含量测定[J].药物分析杂志.2001(01)：56.