QSOX1在子痫前期胎盘中的表达及其对滋养细胞凋亡和增殖功能的影响

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dasaqa
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目的:探究静息巯基氧化酶-1(quiescin sulfhydryl oxidase 1,QSOX1)在子痫前期(preeclampsia,PE)胎盘中的表达情况,QSOX1对滋养细胞的生物学行为的影响,及其参与子痫前期发生的潜在机制。方法:收集2015年11月至2016年12月于重庆医科大学附属第一医院产科住院行选择性剖宫产术的孕妇的胎盘组织,包括正常足月妊娠组(31例)和PE组(35例)。正常氧条件下,人绒毛外滋养细胞系(human transformed primary extravillous trophoblast cell line,HTR8/SVneo)细胞分为小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)阴性对照组(si Control)和QSOX1特异si RNA干扰组(si QSOX1),每组6例样本,实验重复3次。缺氧条件下,HTR8/SVneo细胞分为4组,分别为正常氧处理组(0 h)、缺氧6 h处理组(6 h)、缺氧12 h处理组(12 h)和缺氧24 h处理组(24h),每组各6例样本,实验重复3次。采用Western blot法检测正常孕妇与PE孕妇胎盘中QSOX1的差异表达以及HTR8/SVneo细胞缺氧处理后QSOX1和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的蛋白表达。利用si RNA技术干扰HTR8/Svneo细胞QSOX1的表达,用Western blot法检测转染细胞活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase,Cleaved caspase)相关蛋白和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达水平。并利用流式细胞术检测转染细胞凋亡,比色法检测转染细胞的增殖情况。结果:QSOX1在PE胎盘中的表达明显高于正常胎盘(0.955±0.285 vs.3.921±0.960)(P=0.001)。缺氧处理HTR8/SVneo细胞后QSOX1和HIF-1α的表达均明显升高(1.183±0.160 vs.3.987±0.098;1.051±0.444 vs.1.912±0.118)(均P=0.000)。下调QSOX1后HTR8/SVneo细胞Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9蛋白表达明显减少(2.940±0.514 vs.1.075±0.121;9.223±1.230 vs.1.011±0.019)(P=0.004;P=0.000),而CyclinD1的蛋白表达增加(1.851±0.972 vs.4.189±0.399)(P=0.018)。QSOX1干扰后HTR8/SVneo细胞凋亡能力减低[(21.007±2.214)%vs.(10.057±0.388)%](P=0.001),增殖能力增加(0.389±0.162 vs.1.401±0.059)(P=0.020)。结论:QSOX1高表达引起滋养细胞凋亡增加和增殖减少,可能参与子痫前期的发生。
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