【摘 要】
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目的 探讨ERK1小干扰RNA对大鼠肝癌细胞株生物学特性的影响及其可能的作用机制.方法采用实时RT-PCR及免疫组织化学等方法检测ERK1在大鼠肝癌细胞株、大鼠原代肝细胞与12份人肝癌及配对癌旁组织中的表达,应用腺病毒介导的细胞外信号调节激酶1小干扰RNA(AdshERK1)感染大鼠肝癌细胞株RH-35、H4IIE,观察下调肝癌细胞中ERK1表达后对其生物学特性的影响及下游癌基因表达的变化.采用t
【机 构】
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浙江省绍兴市人民医院消化内科,上海市仁济医院消化内科,200003上海长征医院消化内科,200003上海长征医院消化内科,200003上海长征医院消化内科,200003上海长征医院消化内科,20000
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目的 探讨ERK1小干扰RNA对大鼠肝癌细胞株生物学特性的影响及其可能的作用机制.方法采用实时RT-PCR及免疫组织化学等方法检测ERK1在大鼠肝癌细胞株、大鼠原代肝细胞与12份人肝癌及配对癌旁组织中的表达,应用腺病毒介导的细胞外信号调节激酶1小干扰RNA(AdshERK1)感染大鼠肝癌细胞株RH-35、H4IIE,观察下调肝癌细胞中ERK1表达后对其生物学特性的影响及下游癌基因表达的变化.采用t检验进行统计学分析.结果 12份人肝癌组织中,有11份的ERK1表达较相应癌旁组织明显增多.ERK1在大鼠肝癌细胞株RH-35、H4IIE中的表达较大鼠原代肝细胞表达上调(0.075±0.010、0.458±0.052比0.016±0.003,t=13.806、7.715,P均＜0.01).AdshERK1感染RH-35、H4IIE细胞后,肝癌细胞增殖能力、克隆形成能力显著受抑制.与AdshNC组相比,AdshERK1可明显减少RH-35细胞中S期细胞比例(18.55％±4.80％比4.39％±0.85％,t=-6.826,P＜0.01),引起G0/G1期细胞周期阻滞(76.77％±0.93％比89.57％±1.26％,t=11.676,P＜0.01)；AdshERK1可显著抑制H4IIE细胞在裸鼠皮下成瘤能力[(0.603±0.284) mg比(0.051±0.074) mg,t=-5.340,P＜0.01].AdshERK1下调RH-35、H4IIE细胞ERK1表达,并抑制其下游癌基因c-myc的表达.结论 AdshERK1有抑制大鼠肝癌细胞株RH-35和H4IIE增殖、克隆形成及皮下成瘤能力的作用,且该作用可能与抑制ERK1下游肿瘤相关基因c-myc的表达密切相关。
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