【摘 要】
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目的研究缺氧诱导因子1α（HIF1α）-肾损伤分子1（KIM1）信号通路对高糖环境下人肾小管上皮细胞（HK2）细胞外基质降解的影响，探讨HIF1α-KIM1通路参与糖尿病肾病肾间质纤维化（RIF）的可能机制。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞系（HK2），按如下处理分组:（1）正常对照组（D-葡萄糖5.6 mmol/L）；（2）甘露醇组（D-葡萄糖5.6 mmol/L+D-甘露醇24.4 mmol/
【机 构】
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450052 郑州，郑州大学第一附属医院肾脏内科 郑州大学肾脏病研究所 河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室,450052 郑州，郑州大学第一附属医院肾脏内科 郑州大学肾脏病研究所 河南省高等学校
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目的研究缺氧诱导因子1α（HIF1α）-肾损伤分子1（KIM1）信号通路对高糖环境下人肾小管上皮细胞（HK2）细胞外基质降解的影响，探讨HIF1α-KIM1通路参与糖尿病肾病肾间质纤维化（RIF）的可能机制。
方法体外培养人近端肾小管上皮细胞系（HK2），按如下处理分组:（1）正常对照组（D-葡萄糖5.6 mmol/L）；（2）甘露醇组（D-葡萄糖5.6 mmol/L+D-甘露醇24.4 mmol/L）；（3）高糖组（D-葡萄糖30 mmol/L）；（4）转染对照组；（5）HIF1α siRNA组；（6）KIM1 siRNA组。分别于培养12、24、36 h收获细胞。用Western印迹、实时荧光定量PCR （qRT-PCR）和细胞免疫荧光方法检测细胞HIF1α、KIM1、基质金属蛋白酶9（MMP9）、基质金属蛋白酶抑制物1（TIMP1）、纤维连接蛋白（FN）及Ⅰ型胶原（COL-I）等蛋白及mRNA的表达。
结果与正常对照组相比，高糖组细胞HIF1α、KIM1、TIMP1、FN及COL-I的蛋白及mRNA表达呈时间依赖性增加（均P<0.01)；MMP9蛋白及mRNA表达呈时间依赖性减少（均P<0.01）。与高糖组相比，HIF1α siRNA组细胞HIF1α、KIM1、TIMP1、FN及COL-I的蛋白及mRNA表达明显减少（均P<0.01），MMP9蛋白及mRNA表达明显增多（P<0.01）。与高糖组相比，KIM1 siRNA组细胞KIM1、TIMP1、FN及COL-I蛋白及mRNA表达明显减少（均P< 0.01），MMP9蛋白及mRNA表达明显增多（均P<0.01），而HIF1α表达水平的差异无统计学意义（P>0.05）。
结论高糖环境下HIF1α可能通过调控肾小管上皮细胞KIM1的表达参与糖尿病肾病肾间质纤维化的进程。
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