紫花苜蓿基因转化组织再生过程中褐化因素的分析

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以新疆大叶苜蓿、甘农3号紫花苜蓿和陇东苜蓿的下胚轴为外植体,以农杆菌介导法进行了抗旱基因的转化,针对转化组织在再生过程中出现的褐化现象,分析了转化后的外植体愈伤组织于冬夏两季在诱导、分化及再生过程中的褐化因素,并提出了解决褐化的办法。结果显示:在非季节性影响因素中,2,4-D的作用时间以15~20d为宜,超过30d褐化程度加深;蔗糖浓度在诱导、分化及再生3个阶段分别以30g/L、20g/L、10g/L为宜;基因型也影响褐化指数的高低。在季节性影响因素中,培养温度冬季以恒温25℃为宜,夏季以白天23℃+黑夜
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