论文部分内容阅读
目的通过研究人耳软骨和肋软骨两种不同类型软骨细胞体外分离、增殖、老化规律,为选择合适的组织工程种子细胞提供依据.方法取小耳畸形残耳软骨和肋软骨,体外分别用0.05%和0.15%Ⅱ型胶原酶消化16 h分离,台盼蓝染色计活细胞数,得原代细胞获得率.体外单层培养6代,观察形态学改变,群体倍增时间(PDT),免疫细胞化学染色及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Ⅱ型胶原和Aggrecan评定软骨细胞老化规律.结果人残耳软骨组织平均细胞获得率为(1.54±0.14)×106/g,肋软骨平均获得率为(0.46±0.09)×106/g,两类软骨细胞P1的PDT最短,前3代增殖力较强,P3以后PDT明显延长,P6代细胞不再增殖.免疫细胞化学及RT-PCR均证实耳软骨细胞3代内、肋软骨细胞4代内软骨细胞表型稳定.结论第2代的耳软骨细胞与第3代肋软骨细胞可作为人体内组织工程化软骨构建的种子细胞.