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为研制O型口蹄疫病毒（FMDV）复制缺陷型腺病毒活载体疫苗毒株，通过lit-PCR方法获得了O型FMDV的开放阅读框（ORF）基因，并定向克隆到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中，构建了重组腺病毒穿梭质粒pAdTrack．CMV—ORF，经PCR、酶切及测序鉴定，克隆得到的ORF编码基因序列与原始强毒株O型FMDV的ORF编码基因相似性达99．8％。将含有目的基因的穿梭质粒线性化后和腺病毒骨架载体pAdeasy-2共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细胞中，得到重组腺病毒质粒pAd—ORF，经PC