【摘 要】
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目的探讨早期生长反应基因1(EGR1)对成人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)感染后宿主细胞自噬的影响。方法获得病毒早期感染模型，免疫印迹检测病毒核心蛋白p19、宿主细胞EGR1的表达；荧光素酶报告基因检测EGR1的5′端调控序列转录活性；筛选有效的EGR1 siRNA，将EGR1 siRNA转染HeLa细胞，随后HTLV-1病毒阳性细胞系MT2与HeLa细胞进行共培养，免疫印迹检测病毒核心
【机 构】
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453003 新乡医学院医学检验学院免疫学研究中心；212013 镇江，江苏大学医学院生物化学与分子生物学教研室,453003 新乡，河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心; 453003 新乡医学
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目的探讨早期生长反应基因1(EGR1)对成人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)感染后宿主细胞自噬的影响。
方法获得病毒早期感染模型，免疫印迹检测病毒核心蛋白p19、宿主细胞EGR1的表达；荧光素酶报告基因检测EGR1的5′端调控序列转录活性；筛选有效的EGR1 siRNA，将EGR1 siRNA转染HeLa细胞，随后HTLV-1病毒阳性细胞系MT2与HeLa细胞进行共培养，免疫印迹检测病毒核心蛋白p19、EGR1、自噬相关蛋白LC3；real-time PCR检测病毒载量；免疫荧光检测自噬体数目。
结果共培养后，宿主细胞EGR1蛋白表达和调控序列荧光素酶活性逐渐增强，且EGR1蛋白的表达与细胞自噬水平呈现正相关；筛选了有效的EGR1 siRNA，命名为siE2；共培养模型干扰EGR1的表达后，病毒核酸载量、核心蛋白p19的表达以及自噬相关蛋白LC3B/LC3A比例均下调，同时伴有胞内自噬体数目的减少(P<0.01)。
结论EGR1与HTLV-1感染后宿主细胞自噬水平和病毒复制密切相关。
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