小鼠睾丸组织Bmi1基因的克隆及原核表达

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目的:克隆小鼠Bmi1 cDNA并进行原核表达,为下一步制备BMI1多克隆抗体奠定基础。方法:从小鼠睾丸组织中克隆Bmi1 cDNA,测序并利用BLAST程序比对证明该基因序列正确后,构建原核表达载体pET-28c-Bmi1,将其转人大肠埃希菌BL21中,异丙基-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并通过免疫印迹检测重组目的蛋白。结果:成功克隆了小鼠Bmi1 cDNA,原核表达的融合蛋白可与His标签抗体和BMI1单克隆抗体特异性结合。结论:小鼠睾丸组织中Bmi1基因有表达;成功克隆了小鼠Bmi1 c
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