【摘 要】
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目的 探讨香烟烟雾提取物(CSE)及尼古丁对甲状腺相关眼病(TAO)氧化应激的影响,并以NF-κB为靶点探索其可能的分子机制.方法 取5例无吸烟史的TAO患者和3例无吸烟史的因其他原
【机 构】
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第二军医大学长征医院眼科,上海,200003
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目的 探讨香烟烟雾提取物(CSE)及尼古丁对甲状腺相关眼病(TAO)氧化应激的影响,并以NF-κB为靶点探索其可能的分子机制.方法 取5例无吸烟史的TAO患者和3例无吸烟史的因其他原因行眼外科手术的患者(对照患者)的眼外肌组织,原代培养眼外肌来源的眼眶成纤维细胞(OFs).将OFs经10％ CSE、0.5 μg/mL尼古丁、10 μg/mL尼古丁分别作用,即为CSE组、低浓度尼古丁组和高浓度尼古丁组.分别培养24、72 h后分别采用MTT法、ELISA法和分光光度计法检测各组细胞活性、8-羟脱氧鸟苷(8-OHdG)水平及丙二醛(MDA)含量;24 h后采用酶标仪法检测活性氧(ROS)水平,RT-PCR法检测NF-κB mRNA水平.结果 干预24及72 h后,TAO患者及对照患者OFs的细胞活力在CSE作用下均下降(P＜0.05),且TAO患者对OFs更敏感.高浓度尼古丁干预24 h后,TAO患者OFs的8-OHdG水平增加(P＜0.05);低浓度尼古丁干预72 h时,OFs的8-OHdG水平也增加(P＜0.05).TAO患者及对照患者OFs经CSE或不同浓度尼古丁干预72 h后的MDA含量均增加(P＜0.01).高浓度尼古丁干预24 h后,TAO患者OFs中ROS水平上升(P＜0.01).CSE干预24 h后,TAO患者OFs中NF-κB mRNA的表达上升(P＜0.05);而对照患者OFs NF-κB mRNA的表达经CSE及高浓度尼古丁干预后下降(P＜0.05).结论 吸烟可通过激活TAO患者OFs的氧化应激参与TAO的病理过程,即使吸烟量较少,经时间累积也可能发挥作用,其机制可能是通过上调NF-κB mRNA的表达来实现的.
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