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摘要：目的： 研究子宫颈腺癌中Ezrin蛋白表达及其临床病理学意义。方法： 抽取子宫颈病变标本共60份，其中子宫颈腺癌40份，为观察组，正常子宫颈腺上皮20份，为对照组，均通过免疫组化SP法测定Ezrin蛋白表达，比较两组Ezrin蛋白表达情况，并分析Ezrin蛋白表达与子宫颈腺癌病理因素的关系。结果： 观察组Ezrin蛋白阳性、强阳性表达率分别为85.0%、32.5%，与对照组的10.0%、0.0%比较差异有统计学意义（P<0.01）。另外，子宫颈腺癌晚期、淋巴结转移患者Ezrin蛋白强阳性表达率明显高于子宫颈腺癌早期、淋巴结未转移者，差异有统计学意义（P<0.05）。结论： 子宫颈腺癌中Ezrin蛋白阳性表达高，且Ezrin可能参与肿瘤浸润及转移。
关键词：Ezrin蛋白；子宫颈腺癌；病理学意义
有报道称，我国子宫颈腺癌发病率近年来呈现不断上升、年轻化特点，且肿瘤细胞浸润、转移是导致患者病死的高危因素之一。目前临床关于子宫颈腺癌肿瘤浸润、转移机制尚不明确，但较多实验表明Ezrin蛋白可能参与肿瘤浸润及转移，该蛋白可介导连接细胞膜、细胞骨架，不仅在细胞生长、信号传输过程中起参与作用，而且通过接受胞外信号可重新摆列细胞骨架蛋白，促进细胞运动性能增强，进而最终可能致使肿瘤转移[1]。目前有研究证实Ezrin蛋白参与食管鳞癌肿瘤浸润、转移，但关于Ezrin蛋白与子宫颈腺癌研究相对较少。基于此，本研究通过对照实验分析Ezrin蛋白在子宫颈腺癌中的表达及其临床病理意义，以为疾病临床诊治、预后评价提供依据。报告如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料 以60份子宫颈病变标本为研究对象，其中子宫颈腺癌40份，为观察组，患者年龄35～65岁，50岁以上16例，50岁以下24例，平均（38.5±3.4）岁。FIGO（国际妇产科协会）临床分期：早期（I期+IIa期）26例，晚期（IIb期+IV期）14例。分化程度：高、中、低分化分别为15例、14例、11例。其中淋巴结转移17例，未转移23例。另外正常子宫颈腺上皮20份，为对照组，年龄33～64岁，平均（36.7±3.8）岁。
1.2 方法 通过免疫组化SP法测定60份子宫颈病变标本中Ezrin蛋白表达，操作方法如下：4℃环境中孵育兔抗Ezrin蛋白（稀释比例1：50）单克隆抗体，次日于二抗室（含有辣根过氧化物酶）中孵育45min，DAB显色，苏木精（Mayer法）复染。PBS液代替一抗为空白对照，子宫颈腺癌组织切片为阳性对照。
1.3 判断标准 细胞核内发现棕褐色颗粒提示阳性，根据阳性细胞数所占比例分级染色结果，0级：阳性细胞数比例5%以下，0分；1级：阳性细胞数比例5%～25%，1分；2级：阳性细胞数比例26%～50%，2分；3级：阳性细胞数比例51%～75%，3分；4级：阳性细胞数比例75%以上，4分。阳性程度以染色分级及染色强度为依据，-（阴性）-0分；+（弱阳性）-1～4分；++（中度阳性）-5～8分；+++（强阳性）-9～12分。
1.4 统计学方法 应用SPSS18.0软件分析数据，计数资料率表示，x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组Ezrin蛋白表达情况
观察组Ezrin蛋白阳性表达率85.0%，对照组Ezrin蛋白阳性表达率10.0%，比较差异有统计学意义（P<0.01）。另外观察组Ezrin蛋白强阳性（+++）表达率明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.01）。见表1。
表1 两组Ezrin蛋白表达情况比较
2.2 Ezrin蛋白强阳性与子宫颈腺癌病理因素分析
40例子宫颈腺癌患者中，早期（I期+IIa期）Ezrin蛋白强阳性表达占19.2%，较晚期（IIb期+IV期）的57.1%差异有统计学意义（P<0.05）。淋巴结转移患者Ezrin蛋白强阳性表达占52.9%，较未转移的17.4%差异有统计学意义（P<0.05）。具体情况见表2。
表2 Ezrin蛋白强阳性与子宫颈腺癌病理相关因素分析
讨论
Ezrin蛋白被证明在食管腺癌、胆管癌、胃癌等恶性肿瘤中表达异常，提示Ezrin蛋白可能参与肿瘤浸润、转移过程，但其作用机制尚不清楚。Ezrin蛋白在ERM蛋白家族中占据重要地位，一方面Ezrin C端可将细胞膜与细胞骨架连接，对细胞膜区功能及结构进行调控，另一方面Ezrin N端可与CD44、ICAM（细胞黏附分子）等多个跨膜分子结合[2]，在细胞生长、运动过程中起参与作用，同时还参与细胞骨架重新排列及细胞信号转导过程[3]。尽管Ezrin蛋白表达在较多恶性肿瘤中研究较多，但目前关于Ezrin蛋白与子宫颈腺癌研究报道相对少，特别是Ezrin蛋白与子宫颈腺癌病理学因素的关系。
本研究表1中可知观察组Ezrin蛋白阳性表达、强阳性表达率均明显比对照组高，差异有统计学意义（P<0.01），提示Ezrin蛋白在子宫颈腺癌中阳性表达率高，同时正常子宫颈腺上皮Ezrin蛋白阳性表达率低，且未弱阳性。因此可将Ezrin蛋白表达作为子宫颈腺癌及癌前病变的重要诊断指标。奚美丽[4]等人通过对照实验表明宫颈癌组织中Ezrin蛋白过表达，在宫颈癌浸润、转移过程中可能起参与作用。子宫颈腺癌属于宫颈癌的一种类型，也可从侧面反映Ezrin蛋白可能参与子宫颈腺癌浸润转移。另外，本研究表2中可知子宫颈腺癌晚期、淋巴结转移患者Ezrin蛋白强阳性表达率均明显比早期、淋巴结未转移患者高，差异有统计学意义（P<0.05），即Ezrin蛋白与子宫颈腺癌临床分期、淋巴结转移呈正相关性，提示Ezrin蛋白可作为子宫颈腺癌恶性程度判断的重要指标，与刘启祥[5]等人研究结果基本一致。
综上所述，Ezrin蛋白阳性在子宫颈腺癌中阳性表达强，同时Ezrin可能参与肿瘤浸润及转移过程，临床值得进一步研究。
参考文献：
[1]姚济芬，余明华，张弢，等.Ezrin、MMP-2及TIMP-2在子宫颈癌中的表达与侵袭转移的关系[J].解剖学报，2009，40（3）：433-436.
[2]温娜.子宫颈癌中Ezrin蛋白过表达和DNA倍体检测的临床病理学意义[D].延边大学，2010.
[3]黄恒，崔彬，刘付霖，等.乳腺癌及其转移灶Ezrin、RECK与Kiss-1蛋白表达和意义[J].广东医学，2012，33（10）：1433-1435.
[4]奚美丽，李俊，鹿欣，等.Ezrin蛋白在宫颈癌中表达的临床意义及其与PCNA、MMP-2、MMP-9、HPV E6蛋白的关系[J].中国癌症杂志，2013，23（11）：904-909.
[5]刘启祥，杨洋，张爽，等.Ezrin蛋白过表达在子宫颈腺癌预后评估中的意义[J].临床与实验病理学杂志，2013，29（12）：1313-1316.
关键词：Ezrin蛋白；子宫颈腺癌；病理学意义
有报道称，我国子宫颈腺癌发病率近年来呈现不断上升、年轻化特点，且肿瘤细胞浸润、转移是导致患者病死的高危因素之一。目前临床关于子宫颈腺癌肿瘤浸润、转移机制尚不明确，但较多实验表明Ezrin蛋白可能参与肿瘤浸润及转移，该蛋白可介导连接细胞膜、细胞骨架，不仅在细胞生长、信号传输过程中起参与作用，而且通过接受胞外信号可重新摆列细胞骨架蛋白，促进细胞运动性能增强，进而最终可能致使肿瘤转移[1]。目前有研究证实Ezrin蛋白参与食管鳞癌肿瘤浸润、转移，但关于Ezrin蛋白与子宫颈腺癌研究相对较少。基于此，本研究通过对照实验分析Ezrin蛋白在子宫颈腺癌中的表达及其临床病理意义，以为疾病临床诊治、预后评价提供依据。报告如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料 以60份子宫颈病变标本为研究对象，其中子宫颈腺癌40份，为观察组，患者年龄35～65岁，50岁以上16例，50岁以下24例，平均（38.5±3.4）岁。FIGO（国际妇产科协会）临床分期：早期（I期+IIa期）26例，晚期（IIb期+IV期）14例。分化程度：高、中、低分化分别为15例、14例、11例。其中淋巴结转移17例，未转移23例。另外正常子宫颈腺上皮20份，为对照组，年龄33～64岁，平均（36.7±3.8）岁。
1.2 方法 通过免疫组化SP法测定60份子宫颈病变标本中Ezrin蛋白表达，操作方法如下：4℃环境中孵育兔抗Ezrin蛋白（稀释比例1：50）单克隆抗体，次日于二抗室（含有辣根过氧化物酶）中孵育45min，DAB显色，苏木精（Mayer法）复染。PBS液代替一抗为空白对照，子宫颈腺癌组织切片为阳性对照。
1.3 判断标准 细胞核内发现棕褐色颗粒提示阳性，根据阳性细胞数所占比例分级染色结果，0级：阳性细胞数比例5%以下，0分；1级：阳性细胞数比例5%～25%，1分；2级：阳性细胞数比例26%～50%，2分；3级：阳性细胞数比例51%～75%，3分；4级：阳性细胞数比例75%以上，4分。阳性程度以染色分级及染色强度为依据，-（阴性）-0分；+（弱阳性）-1～4分；++（中度阳性）-5～8分；+++（强阳性）-9～12分。
1.4 统计学方法 应用SPSS18.0软件分析数据，计数资料率表示，x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组Ezrin蛋白表达情况
观察组Ezrin蛋白阳性表达率85.0%，对照组Ezrin蛋白阳性表达率10.0%，比较差异有统计学意义（P<0.01）。另外观察组Ezrin蛋白强阳性（+++）表达率明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.01）。见表1。
表1 两组Ezrin蛋白表达情况比较
2.2 Ezrin蛋白强阳性与子宫颈腺癌病理因素分析
40例子宫颈腺癌患者中，早期（I期+IIa期）Ezrin蛋白强阳性表达占19.2%，较晚期（IIb期+IV期）的57.1%差异有统计学意义（P<0.05）。淋巴结转移患者Ezrin蛋白强阳性表达占52.9%，较未转移的17.4%差异有统计学意义（P<0.05）。具体情况见表2。
表2 Ezrin蛋白强阳性与子宫颈腺癌病理相关因素分析
讨论
Ezrin蛋白被证明在食管腺癌、胆管癌、胃癌等恶性肿瘤中表达异常，提示Ezrin蛋白可能参与肿瘤浸润、转移过程，但其作用机制尚不清楚。Ezrin蛋白在ERM蛋白家族中占据重要地位，一方面Ezrin C端可将细胞膜与细胞骨架连接，对细胞膜区功能及结构进行调控，另一方面Ezrin N端可与CD44、ICAM（细胞黏附分子）等多个跨膜分子结合[2]，在细胞生长、运动过程中起参与作用，同时还参与细胞骨架重新排列及细胞信号转导过程[3]。尽管Ezrin蛋白表达在较多恶性肿瘤中研究较多，但目前关于Ezrin蛋白与子宫颈腺癌研究报道相对少，特别是Ezrin蛋白与子宫颈腺癌病理学因素的关系。
本研究表1中可知观察组Ezrin蛋白阳性表达、强阳性表达率均明显比对照组高，差异有统计学意义（P<0.01），提示Ezrin蛋白在子宫颈腺癌中阳性表达率高，同时正常子宫颈腺上皮Ezrin蛋白阳性表达率低，且未弱阳性。因此可将Ezrin蛋白表达作为子宫颈腺癌及癌前病变的重要诊断指标。奚美丽[4]等人通过对照实验表明宫颈癌组织中Ezrin蛋白过表达，在宫颈癌浸润、转移过程中可能起参与作用。子宫颈腺癌属于宫颈癌的一种类型，也可从侧面反映Ezrin蛋白可能参与子宫颈腺癌浸润转移。另外，本研究表2中可知子宫颈腺癌晚期、淋巴结转移患者Ezrin蛋白强阳性表达率均明显比早期、淋巴结未转移患者高，差异有统计学意义（P<0.05），即Ezrin蛋白与子宫颈腺癌临床分期、淋巴结转移呈正相关性，提示Ezrin蛋白可作为子宫颈腺癌恶性程度判断的重要指标，与刘启祥[5]等人研究结果基本一致。
综上所述，Ezrin蛋白阳性在子宫颈腺癌中阳性表达强，同时Ezrin可能参与肿瘤浸润及转移过程，临床值得进一步研究。
参考文献：
[1]姚济芬，余明华，张弢，等.Ezrin、MMP-2及TIMP-2在子宫颈癌中的表达与侵袭转移的关系[J].解剖学报，2009，40（3）：433-436.
[2]温娜.子宫颈癌中Ezrin蛋白过表达和DNA倍体检测的临床病理学意义[D].延边大学，2010.
[3]黄恒，崔彬，刘付霖，等.乳腺癌及其转移灶Ezrin、RECK与Kiss-1蛋白表达和意义[J].广东医学，2012，33（10）：1433-1435.
[4]奚美丽，李俊，鹿欣，等.Ezrin蛋白在宫颈癌中表达的临床意义及其与PCNA、MMP-2、MMP-9、HPV E6蛋白的关系[J].中国癌症杂志，2013，23（11）：904-909.
[5]刘启祥，杨洋，张爽，等.Ezrin蛋白过表达在子宫颈腺癌预后评估中的意义[J].临床与实验病理学杂志，2013，29（12）：1313-1316.