【摘 要】
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目的:探讨Survivin的显性负突变体SurvivinT34A的重组腺病毒治疗小鼠Lewis肺癌(Lewis lung Cancer,LLC)的效果及作用机制.方法:采用Gateway技术分别构建、制备高滴度的人源的
【机 构】
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610041 成都,四川省肿瘤医院·研究所,四川省癌症防治中心,电子科技大学医学院,放射肿瘤学四川省重点实验室;四川大学 生物治疗国家重点实验室,成都,610041;西南医科大学附属中医医院 肿瘤血液
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目的:探讨Survivin的显性负突变体SurvivinT34A的重组腺病毒治疗小鼠Lewis肺癌(Lewis lung Cancer,LLC)的效果及作用机制.方法:采用Gateway技术分别构建、制备高滴度的人源的SurvivinT34A重组腺病毒(Ad-hSurvivinT34A,Ad-HS)和鼠源的SurvivinT34A重组腺病毒(Ad-mSurvivinT34A,Ad-MS).在体外试验中,采用Hoechst染色和流式细胞术检测感染重组腺病毒的小鼠LLC细胞的促凋亡作用.在体内实验中,绘制肿瘤生长曲线和荷瘤小鼠的生存曲线观察Ad-HS和Ad-MS的抗LLC肿瘤效果;TUNEL荧光显色检测肿瘤组织内凋亡情况;通过CD31免疫组化染色,观察肿瘤组织内新生血管抑制情况;通过Cr51释放法检测脾T细胞对肿瘤细胞的特异杀伤活性.结果:制备的高纯度和高滴度的Ad-HS和Ad-MS在体外均能够有效诱导抗LLC肿瘤效应,其中异种重组腺病毒(Ad-HS)的效果更好,但差异无统计学意义.主要表现为治疗组肿瘤细胞凋亡率增加,肿瘤组织内微血管密度降低,激发肿瘤特异性的细胞免疫反应,杀伤LLC肿瘤细胞,因此治疗组荷瘤小鼠肿瘤生长缓慢,生存期延长.结论:异种Ad-hSurvivinT34A重组腺病毒对LLC细胞有较强的抑制作用.
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