【摘 要】
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目的建立检测巨噬细胞移动抑制因子含量的ELISA检测法。方法采用方阵滴定法,比较4种封闭液、不同稀释度的捕获抗体、检测抗体和辣根过氧化酶标记链菌素对检测结果的影响,确定
【机 构】
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广东省人民医院医学研究中心广东省冠心病研究重点实验室; 广东省人民医院医学研究中心广东省冠心病研究重点实验室 广州510080; 广州510080;
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.30300421,30571850);广东省科技计划项目(No.2004B30601009);广东省自然基金(No.04102307);广东省医学科研基金(No.A2005047)
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目的建立检测巨噬细胞移动抑制因子含量的ELISA检测法。方法采用方阵滴定法,比较4种封闭液、不同稀释度的捕获抗体、检测抗体和辣根过氧化酶标记链菌素对检测结果的影响,确定ELISA法的最佳实验条件。结果包被用捕获抗体的最适浓度为4mg/L,检测抗体的最适浓度为200mg/L,Streptavidin-HRP的最适稀释度为1∶5000。该方法的检测灵敏度为0.156μg/L,变异系数为7.3%～9.6%,回收率为91.2%～113.6%,与VEGF、TNF-α、IL-6、ICAM-1、胆红素、血红蛋白及甘油三酯均无交叉反应。结论建立的ELISA检测法简便、特异且灵敏,适用于检测血清中的MIF水平。
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