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通过终浓度含Cu2+为0 μmol/L(对照组)、10 μmol/L(低浓度组)、50 μmol/L(中浓度组)、100 μmol/L(高浓度组)的体外培养体系分别处理小鼠精原细胞(GC-1 spg细胞),在培养12、24、36 h时,应用流式细胞仪检测GC-1 spg细胞的活性氧(ROS)水平及线粒体膜电位(Δψm)变化,应用高分辨率呼吸仪检测基础呼吸、质子漏、呼吸控制比率(RCR)、剩余氧通量(ROX),以评价不同浓度Cu2+对体外培养GC-1 spg细胞ROS产生及线粒体功能的影响。结果显示:与对照组相比,培养12 h三个Cu2+处理组的ROS水平显著升高,低浓度组和中浓度组的ROX显著升高,Δψm、基础呼吸、质子漏和RCR无明显变化;培养24 h中浓度组和高浓度组ROS和ROX显著升高,三个Cu2+处理组Δψm、中浓度组和高浓度组的基础呼吸和高浓度组的RCR显著下降,质子漏无明显变化;培养36 h中浓度组和高浓度组ROS水平显著升高、三个Cu2+处理组的质子漏、ROX显著升高,三个Cu2+处理组的Δψm、中浓度组和高浓度组的RCR显著下降,基础呼吸无明显变化。结果表明:在Cu2+处理的GC-1 spg细胞中,ROS的产生先于Cu2+诱导的线粒体功能障碍。