苏云金芽孢杆菌CrylAb13基因的克隆及表达研究

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BrC005是我国自行分离的对多种害虫具有毒杀作用的苏云金芽孢杆菌,经PCR-RFLP系统鉴定,它含有crylAb基因.Southern b1ot结果显示:PstI酶切C005质粒所得的8.5kb长的DNA片段为crylAb基因的阳性杂交带.以pUCP19为载体,克隆了该片段并证明其含有crylAb基因.对其进行亚克隆和测序,结果表明该基因编码区为3468bp,其编码的蛋白含1155个氨基酸,分子量为130.6kD,等电点为pH4.845.该基因已在GenBank基因库中注册,Accessionnumber为AF254640,并为国际Bt杀虫晶体蛋白基因命名委员会正式命名为crylAbJ3.将crylAb13基因在Bt无晶体突变株cryB-中表达,蛋白质电泳结果表明在130kD处有表达带,并证明CryAb对小菜蛾有较高的杀虫活性.
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