CD133对CD133+/Sox2+脑肿瘤干细胞增殖、侵袭及药物敏感性的影响

来源 :中国临床药理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:thonary09
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目的分析靶向下调CD133表达对CD133+/Sox2+脑肿瘤干细胞增殖、侵袭及药物敏感性的影响。方法用肿瘤微球法从脑胶质瘤细胞系U251中筛选出CD133和Sox2均为阳性的脑肿瘤干细胞,后设计并合成针对CD133的特异性shRNA片段,构建GV115-shCD133RNA重组质粒,将其转染CD133+/Sox2+U251细胞,设为实验组(GV115-shCD133RNA-CD133+/Sox2+U251细胞),并设立空白组(CD133+/Sox2+U251细胞)和对照组(GV115-shRNA-CD133+/Sox2+U251细胞)。用Celigo细胞计数实验和Transwell实验分别检测细胞增殖能力和侵袭能力。向3组细胞分别加入8个不同浓度的顺铂和替莫唑胺(200%,150%,100%,75%,50%,25%,12.5%和5%),其中100%顺铂和和替莫唑胺的质量浓度分别为4和18μg·mL-1),用Celigo细胞计数实验检测细胞增殖能力的变化,以评估其对药物敏感性的影响。结果实验组、对照组和空白组的CD133 mRNA分别为0.24±0.01,1.00±0.03和1.08±0.04,侵袭细胞个数分别为(18.93±0.64),(66.82±2.89)和(69.43±3.22)个,实验组的上述指标与空白组和对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。从第1~5天,实验组的细胞增殖能力均明显低于对照组和空白组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。实验组、对照组和空白组的顺铂半抑制浓度(IC50)分别为(1.06±0.11),(4.03±0.21)和(3.94±0.25)μg·mL-1,替莫唑胺IC50分别为(4.23±0.38),(18.06±2.13)和(17.48±2.05)μg·mL-1,实验组对顺铂和替莫唑胺的药物敏感性与对照组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论靶向下调CD133表达能有效抑制脑胶质瘤干细胞的增殖及侵袭能力,提高其对化疗药物的敏感性。
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