【摘 要】
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应用RT-PCR技术,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞中,扩增出抗体VH和VL基因,连接成ScFv基因,并将其克隆至pGEM-T载体中构建了重组质粒pXS
【机 构】
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河北师范大学生命科学学院,解放军军需大学军事兽医研究所
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应用RT-PCR技术,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞中,扩增出抗体VH和VL基因,连接成ScFv基因,并将其克隆至pGEM-T载体中构建了重组质粒pXScFv-2E3.经序列分析证实,VH和VL基因及linker基因拼接正确,基因全长为726bp,编码242个氨基酸.随后将其定向克隆于表达载体pHOG21,转化至大肠杆菌XL1-BLUE筛选出表达菌株XL1-BLUE(pHOG-2E3).经ELISA和SDS-PAGE分析表明,在20℃用IPTG诱导培养时,表达的ScFv
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