【摘 要】
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目的 用过氧化氢碳酰胺(carbamide peroxide,CP)作为诱导剂,诱导猪髂动脉内皮细胞(pig iliac endothelium cells,PIEC)衰老,建立体外内皮细胞衰老模型.方法 MTT法及DAH染色法确定CP对PIEC作用的最佳诱导浓度.细胞经过诱导后,形态学观察、MTT法、EdU掺入实验、SA-β-gal染色以及细胞迁移实验分析诱导细胞增殖活性、衰老比例以及迁移能力改
【机 构】
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637000南充,川北医学院附属医院老年科,637000南充,川北医学院附属医院老年科,637000南充,川北医学院附属医院风湿血液研究所
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目的 用过氧化氢碳酰胺(carbamide peroxide,CP)作为诱导剂,诱导猪髂动脉内皮细胞(pig iliac endothelium cells,PIEC)衰老,建立体外内皮细胞衰老模型.方法 MTT法及DAH染色法确定CP对PIEC作用的最佳诱导浓度.细胞经过诱导后,形态学观察、MTT法、EdU掺入实验、SA-β-gal染色以及细胞迁移实验分析诱导细胞增殖活性、衰老比例以及迁移能力改变.PI单染流式细胞术分析诱导前后细胞周期的分布变化.结果 40 μmol/L为CP诱导内皮细胞的最佳浓度,诱导1h后,细胞变大变圆,呈典型的衰老表现,增殖活性和迁移能力下降,SA-β-gal染色显示衰老细胞比例明显增大,流式细胞分析显示大量细胞阻滞于G0/G1期.结论 CP能够体外诱导血管内皮细胞衰老,是一种安全高效的体外细胞衰老诱导剂。
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