【摘 要】
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目的 探究miR-188-3p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其抑制HCC细胞侵袭和迁移的分子机制.方法 利用RT-qPCR检测miR-188-3p在人HCC组织和细胞系中的表达情况,进一步分析miR-188-3p表达在HCC中的临床价值;利用Western印迹检测转染miR-188-3p mimics和inhibi-tor对HCC细胞中YAP1蛋白的影响;分别利用Transwell侵袭和迁移实验检测各组细胞的侵袭和迁移能力;利用双荧光素酶基因报告实验检测m
【机 构】
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武汉大学中南医院 肝胆胰外科 武汉市, 430071;武汉大学中南医院 超声影像科 武汉市, 430071
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目的 探究miR-188-3p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其抑制HCC细胞侵袭和迁移的分子机制.方法 利用RT-qPCR检测miR-188-3p在人HCC组织和细胞系中的表达情况,进一步分析miR-188-3p表达在HCC中的临床价值;利用Western印迹检测转染miR-188-3p mimics和inhibi-tor对HCC细胞中YAP1蛋白的影响;分别利用Transwell侵袭和迁移实验检测各组细胞的侵袭和迁移能力;利用双荧光素酶基因报告实验检测miR-188-3p对YAP1的靶向调控机制;最后,通过共转染miR-188-3p mimics和YAP1过表达质粒进行回复实验.结果 miR-188-3p在HCC组织中表达显著低于正常肝组织,其低表达与肿瘤大小、 肿瘤分化程度、 以及TNM分期密切相关(P均<0.05);生存分析显示HCC组织中miR-188-3p低表达提示不良预后(Log-rankP=0.025).体外细胞实验显示,过表达miR-188-3p显著抑制HCC细胞的侵袭和迁移能力,而抑制miR-188-3p表达则呈现出相反的效果.双荧光素酶报告基因实验显示,miR-188-3p可通过与YAP1的3′UTR结合靶向抑制YAP1蛋白的表达.回复实验结果证实,miR-188-3p对HCC侵袭和迁移能力的抑制是通过抑制YAP1蛋白的表达实现.结论 miR-188-3p在HCC中呈低表达,其通过靶向抑制YAP1的表达抑制HCC细胞的侵袭和迁移,从而参与HCC的发生和进展.
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