【摘 要】
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该实验以前期克隆的亚麻4CL基因片段为靶序列,利用RACE方法克隆其全长cDNA序列(1 957 bp),GenBank登录号为KC832864,该序列含有1 650 bp完整的开放阅读框.系统进化树分析表明
【机 构】
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中国农业科学院麻类研究所,湖南环境生物职业技术学院,湖南农业大学作物基因工程湖南省重点实验室
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该实验以前期克隆的亚麻4CL基因片段为靶序列,利用RACE方法克隆其全长cDNA序列(1 957 bp),GenBank登录号为KC832864,该序列含有1 650 bp完整的开放阅读框.系统进化树分析表明,亚麻4CL基因与盐芥4CL基因亲缘关系较近,而与禾本科的水稻(Oryza sativa)等亲缘关系最远.其编码蛋白预测分析结果显示,亚麻4CL基因由549个氨基酸组成,相对分子量为60 kD,等电点为5.3,蛋白质二级结构以无规则卷曲比例最多,其次是α-螺旋.以亚麻4CL基因编码区413 bp靶标序列作为干扰区段,扩增其正反向基因片段,构建植物干扰表达载体p1301M-4CL.通过农杆菌介导转入亚麻,DNA及RNA水平上分子检测发现,RNAi结构已经转入亚麻中,并显著降低了其4CL基因的表达量.
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