维吾尔族妇女宫颈病变及人乳头状瘤病毒感染与抗原处理相关转运体TAP1和TAP2基因启动子甲基化的关系

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目的 探讨维吾尔族妇女宫颈病变及人乳头状瘤病毒(HPV)感染与抗原处理相关转运体(TAP)基因启动子区甲基化水平的关系和意义.方法 利用专业软件设计TAP1和TAP2基因启动子区含CpG岛特异性PCR引物,对宫颈癌SiHa细胞DNA进行亚硫酸氢盐修饰、目的片段扩增、质粒载体克隆和测序,确定该区域所含CpG序列的甲基化情况.收集维吾尔族妇女15例正常宫颈上皮、30例宫颈鳞状上皮内肿瘤形成(CIN)和33例宫颈鳞癌患者的新鲜组织标本共78例,提取DNA,采用MassArray DNA技术平台(质谱分析)定量分析TAP1和TAP2基因启动子甲基化水平,同时以HPV分型芯片鉴定HPV亚型,分析基因甲基化与HPV感染的关系.结果 (1)TAP1和TAP2基因相应目的片段各含23个和8个CpG位点,在宫颈癌SiHa细胞基因组DNA中,分别有5个和8个CpG位点发生甲基化.宫颈病变病理过程伴随着TAP1基因CpG片段甲基化水平的改变,其在宫颈鳞癌和CIN组织的甲基化率[(0.048±0.039)和(0.037±0.026)]高于正常宫颈上皮组织(0.035±0.029),差异有统计学意义(P<0.05).尽管TAP2基因甲基化水平也发生了相应改变,但其差异无统计学意义(P>0.05).HPV分型芯片检出13种HPV基因型,其中HPV16所占比率为66.7%(52/78),HPV16亚型阳性与宫颈病变进程及TAP1基因甲基化率的升高趋势呈正相关(x2=6.08,P=0.039).结论 TAP1基因启动子区CpG岛甲基化是宫颈癌病变的一种特异性改变,与HPV16感染可能存在密切关系。

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