【摘 要】
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目的:评估高糖对肾组织干细胞(kidney stem cells,KSC)条件培养液修复缺氧损伤肾小管上皮细胞(renal tubular epithelium cells,RTEC)作用的影响.方法:分离肾乳头处的KSC,分
【机 构】
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中国人民解放军总医院南楼临床部肾脏病科,肾脏疾病国家重点实验室,北京100853中国人民解放军总医院南楼临床部内分泌科,北京,100853;军事医学科学院干细胞与再生医学实验室,北京,100850;
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目的:评估高糖对肾组织干细胞(kidney stem cells,KSC)条件培养液修复缺氧损伤肾小管上皮细胞(renal tubular epithelium cells,RTEC)作用的影响.方法:分离肾乳头处的KSC,分别用正常糖浓度(简称“正糖”,5.6 mmol/L)和高糖(30 mmol/L)培养基对KSC进行预处理后制备KSC条件培养液.建立大鼠RTEC缺氧/复氧模型,比较高糖与正糖刺激后KSC条件培养液对缺氧/复氧RTEC修复作用的差异.结果:(1)缺氧4h/复氧2h为RTEC缺氧/复氧模型的最佳时间.(2)缺氧后,RTEC早期凋亡率和晚期凋亡率均升高,采用KSC条件培养液干预12h和24 h后,与缺氧/复氧对照组相比,正糖缺氧/复氧组和高糖缺氧/复氧组RTEC的凋亡率均明显降低(P＜0.01).正糖组和高糖组比较,干预24 h后,正糖组RTEC的总体凋亡率显著低于高糖组(P=0.02).(3)缺氧后,RTEC上清液的乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平明显升高(P＜0.01),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平明显降低(P＜0.01).采用KSC条件培养液干预12 h和24 h后,与缺氧/复氧对照组相比,正糖缺氧/复氧组和高糖缺氧/复氧组的LDH和MDA水平均显著降低(P＜0.01),SOD水平均显著升高(P＜0.01).正糖组和高糖组比较,高糖组的LDH和MDA水平要显著高于正糖组(P＜0.05),SOD水平要显著低于正糖组(P ＜0.01).结论:KSC条件培养液对缺氧损伤的RTEC有修复作用,这种作用主要是通过减少氧化应激、抑制细胞凋亡来实现的,而经高糖预处理的KSC条件培养液的抗氧化应激、抗凋亡作用减弱.
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